Příprava rekombinantního proteinu Synaptotagminu 7.

0323965 - ÚMG 2009 RIV CZ cze L - Prototyp, funkční vzorek
Černý, J. - Hořejší, Václav
Příprava rekombinantního proteinu Synaptotagminu 7.
[Preparation of recombinant protein Synaptotagmin 7.]
Interní kód: Syt7 ; 2008
Technické parametry: Purifikovaný rekombinantní protein Synaptotagminu 7
Ekonomické parametry: Výsledek připraven ke komerčnímu využití
Grant CEP: GA MŠMT 1M0506
Výzkumný záměr: CEZ:AV0Z50520514
Klíčová slova: Synaptotagmin 7 * recombinant protein * immunization
Kód oboru RIV: EB - Genetika a molekulární biologie

Byly navrženy čtyři sady sady primerů s restrikčními místy pro restriktázy BamHI a XhoI pro přípravu čtyř reprezentativních fragmentů Syt7, dostatečně odlišných od ostatních fosfodiesteráz. Fragmenty byly přes restrikční místa XhoI/BamHI vloženy do expresního vektoru pGEX- 2TL, který nese sekvenci pro GST tag a byly exprimovány v buňkách E. coli BL21/ (λDE3) pLys. Výsledný protein byl purifikován standardními metodami v množství dostatečném pro imunizaci.

Four sets of primers with restriction sites for restrictases BamHI a XhoI were designed for preparation of of four representative fragments of Syt7, sufficiently different from other phosphodiesterases. The fragments were inserted via the XhoI/BamHI restriction sites into expression vectoru pGEX- 2TL carrying the sequence for GST tag and were expressed in cells E. coli BL21/ (lambdaDE3) pLys. The protein produced was purified by standard methods in the amounts sufficient for immunization.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0171785