0027836 - ÚMG 2006 RIV NL eng J - Článek v odborném periodiku
Adamec, T. - Palková, Zdena - Velková, K. - Štokrová, Jitka - Forstová, J.
Point mutation in calcium-binding domain of mouse polyomavirus VP1 protein does not prevent virus-like particle formation, but changes VP1 interactions with Saccharomyces cerevisiae cell structures.
[Bodová mutace ve vápník-vážící doméně VP1 proteinu myšího polyomaviru nebrání tvorbě viru podobných částic ale pozměňuje interakce VP1 s buněčnými strukturami Saccharomyces cerevisiae.]
FEMS Yeast Research. Roč. 5, 4-5 (2005), s. 331-340. ISSN 1567-1356. E-ISSN 1567-1364
Grant CEP: GA ČR GA204/03/0593
Výzkumný záměr: CEZ:AV0Z5052915
Klíčová slova: polyomavirus VP1 * Saccharomyces cerevisiae * heterologous expression
Kód oboru RIV: EB - Genetika a molekulární biologie
Impakt faktor: 2.477, rok: 2005

The mouse polyomavirus gene for the major structural protein, VP1, with point mutation in the calcium-binding pocket (VP1Ala), was expressed in Saccharomyces cerevisiae and in baculovirus expression systém. Surprisingly, VP1Ala forms virus-like particles (VLPs) in nuclei of both yeast and insect cells. VP1Ala – VLPs produced in S. cerevisiae are unstable and, unlike wild type VP1 (VP1wt)- VLPs, they dissasemble during the purification procedure and storage. In contrast to VP1wt , VP1Ala does not interact with the yeast mitotic spindle. Nevertheless, both wild type and mutated VP1 inhibit yeast cell growth and this inhibition is c-AMP dependent. The production of VP1Ala and VP1Ala -VLPs in insect cells also revealed differences in their interactions with cellular proteins(s). Thus, the mutation in the VP1 calcium pocket alters the stability and surface conformation of VLPs rather than the ability of VP1 to self-assemble.

Gen pro velký strukturní protein VP1 myšího polyomaviru s bodovou mutací v Ca-vazebné doméně (VP1Ala) byl exprimován v buňkách Sacharomyces cerevisiae a bakulovirovém expresním systému. Překvapivě v obou systémech VP1Ala tvořil viru podobné částice (VLPs). VLPs tvořené v Sach. Cerevisiae jsou nestabilní a na rozdíl od divokého typu VP1 se snadno rozkládají a neintergují s kvasinkovým mitotickým vřeténkem.. Nicméně oba typy jak divoký tak mutovaný VP1 inhibují růst kvasinkových buněk a tato inhibice je závislá na c-AMP. Uvedená mutace v Ca-vazebné doméně VP1 mění spíše stabilitu a povrchovou strukturu VLPs než schopnost tvorby částic.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0117874