Počet záznamů: 1
Engineering the cytokinin-glucoside specificity of the maize beta-D-glucosidase Zm-p60.1 using site-directed random mutagenesis
- 1.
SYSNO ASEP 0440809 Druh ASEP J - Článek v odborném periodiku Zařazení RIV J - Článek v odborném periodiku Poddruh J Článek ve WOS Název Engineering the cytokinin-glucoside specificity of the maize beta-D-glucosidase Zm-p60.1 using site-directed random mutagenesis Tvůrce(i) Filipi, T. (CZ)
Mazura, P. (CZ)
Janda, L. (CZ)
Kiran, N.S. (CZ)
Brzobohatý, Břetislav (BFU-R) RID, ORCIDCelkový počet autorů 5 Zdroj.dok. Phytochemistry. - : Elsevier - ISSN 0031-9422
Roč. 74, FEB2012 (2012), s. 40-48Poč.str. 9 s. Forma vydání Tištěná - P Jazyk dok. eng - angličtina Země vyd. GB - Velká Británie Klíč. slova beta-Glucosidase ; cis-Zeatin-O-beta-D-glucopyranoside ; Cytokinin metabolism Vědní obor RIV BO - Biofyzika Institucionální podpora BFU-R - RVO:68081707 UT WOS 000300815700004 DOI 10.1016/j.phytochem.2011.10.008 Anotace The maize beta-D-glucosidase Zm-p60.1 releases active cytokinins from their storage/transport forms, and its over-expression in tobacco disrupts zeatin metabolism. The role of the active-site microenvironment in fine-tuning Zm-p60.1 substrate specificity has been explored, particularly in the W373K mutant, using site-directed random mutagenesis to investigate the influence of amino acid changes around the 373 position. Two triple (P372T/W373K/M376L and P372S/W373K/M376L) and three double mutants (P372T/W373K, P372S/W373K and W373K/M376L) were prepared. Their catalytic parameters with two artificial substrates show tight interdependence between substrate catalysis and protein structure. P372T/W373K/M376L exhibited the most significant effect on natural substrate specificity: the ratio of hydrolysis of cis-zeatin-O-beta-D-glucopyranoside versus the trans-zeatin-O-beta-D-glucopyranoside shifted from 1.3 in wild-type to 9.4 in favor of the cis- isomer. Pracoviště Biofyzikální ústav Kontakt Jana Poláková, polakova@ibp.cz, Tel.: 541 517 244 Rok sběru 2015
Počet záznamů: 1