Počet záznamů: 1

Comparison of methods of high-pressure freezing and automated freeze-substitution of suspension cells combined with LR White embedding

SYSNO ASEP	0355818
Druh ASEP	J - Článek v odborném periodiku
Zařazení RIV	J - Článek v odborném periodiku
Poddruh J	Článek ve WOS
Název	Comparison of methods of high-pressure freezing and automated freeze-substitution of suspension cells combined with LR White embedding
Tvůrce(i)	Sobol, Margaryta (UMG-J)_RID Philimonenko, Vlada (UMG-J) Hozák, Pavel (UMG-J)_{RID, ORCID}
Zdroj.dok.	Histochemistry and Cell Biology. - : Springer - ISSN 0948-6143 Roč. 134, č. 6 (2010), s. 631-641
Poč.str.	11 s.
Jazyk dok.	eng - angličtina
Země vyd.	DE - Německo
Klíč. slova	cryofixation ; automated freeze-substitution ; LR White
Vědní obor RIV	EB - Genetika a molekulární biologie
CEP	KAN200520704 GA AV ČR - Akademie věd
	2B06063 GA MŠMT - Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy
	LC545 GA MŠMT - Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy
CEZ	AV0Z50520514 - UMG-J (2005-2011)
UT WOS	000284645000010
DOI	10.1007/s00418-010-0757-z
Anotace	In this study we present an optimized method of high-pressure freezing and automated freeze-substitution of cultured human cells, followed by LR White embedding, for subsequent immunolabeling. Also, the influence of various conditions of the freeze-substitution procedures such as temperature, duration, and additives in the substitution medium on the preservation of cryo-immobilized cells was analyzed. The recommended approach combines (1) automated freeze-substitution for high reproducibility and minimizing human-derived errors; (2) minimal addition of contrasting and fixing agents; (3) easy-to-use LR White resin for embedment; (4) good preservation of nuclei and nucleoli which are usually the most difficult structures to effectively vitrify and saturate in a resin; and (5) preservation of antigens for sensitive immunogold labeling.
Pracoviště	Ústav molekulární genetiky
Kontakt	Nikol Škňouřilová, nikol.sknourilova@img.cas.cz, Tel.: 241 063 217
Rok sběru	2011

Počet záznamů: 1