Počet záznamů: 1
Zjednodušená trypsinizace buněk
- 1.
SYSNO ASEP 0324480 Druh ASEP L - Prototyp, funkční vzorek Zařazení RIV G - Technicky realizované výsledky (prototyp, funkční vzorek) Poddruh RIV Funkční vzorek Název Zjednodušená trypsinizace buněk Překlad názvu A simplified trypsinisation of cells Tvůrce(i) Bačáková, Lucie (FGU-C) RID, ORCID Rok vydání 2007 Int.kód Zjednodušená trypsinizace Lokalizace výsledku FGU-C Technické parametry Zjednodušená procedura oddělení buněk od kultivační podložky trypsinem a EDTA Ekonomické parametry - Název vlastníka Fyziologický ústav AVČR v. v. i. IČ vlastníka 67985823 Kat.výsl.dle nákl. A - Vyčerpaná část nákladů <= 5 mil. Kč Využ. jiným subjektem N - Využití výsledku jiným subjektem je možné bez nabytí licence Požad. na licenč. popl. N - Poskytovatel licence nepožaduje licenční poplatek Jazyk dok. cze - čeština Země vlastníka CZ - Česká republika Klíč. slova cell culture ; cell trypsinization ; cell seeding Vědní obor RIV EI - Biotechnologie a bionika CEP 1QS500110564 GA AV ČR - Akademie věd KAN400480701 GA AV ČR - Akademie věd KAN101120701 GA AV ČR - Akademie věd 2A-1TP1/073 GA MPO - Ministerstvo průmyslu a obchodu NR9358 GA MZd - Ministerstvo zdravotnictví 2B06173 GA MŠMT - Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy CEZ AV0Z50110509 - FGU-C (2005-2011) Anotace Klasický postup zahrnuje odstranění média z kultivační nádoby, opláchnutí buněk fyziologickým roztokem pufrovaným fosfáty (PBS) a přidání určitého relativně velkého objemu roztoku trypsinu či trypsinu-EDTA.Po oddělení od podložky musí být buňky separovány od trypsinu či trypsinu-EDTA centrifugací a dále resuspendovány v kultivačním médiu. Nevýhodou tohoto postupu je však příliš dlouhá expozice buněk. Dochází k nezanedbatelným ztrátám buněk.Vyvinuli jsme zjednodušený, efektivní postup: po odstranění média a opláchnutí PBS jsou buňky 2x po sobě opláchnuty polovinou objemu roztoku trypsinu či trypsinu-EDTA. V lahvi je po opláchnutí ponecháno jen malé množství roztoku, a to pouze takové, aby stačilo k udržení buněk ve vlhkém stavu (tj. např. 0.5 ml na láhev o ploše 25cm2 a 1,5 ml na láhev o ploše 75cm2). Uvolnění buněk napomáháme inkubací v 37oC a jemným třepáním láhví. Poté je resuspendujeme v kultivačním médiu či v jiném roztoku podle účelu jejich dalšího užití Překlad anotace The classical technique involves removing the cell culture medium, rinsing cells with phosphate-buffered saline (PBS) and adding a relatively large volume of trypsin or trypsin-EDTA solution.After release, the cells must be separated from the trypsin or trypsin-EDTA solution by centrifugation. A disadvantage of this approach is a relatively long exposure of cells. In addition, the centrifugation can lead to a considerable cell loss, which is not negligible if only a small amount of cells is available. Therefore we invented the following simplified but highly effective approach: after the medium removal and rinsing cells with PBS, the cells are rinsed twice with a half volume of the trypsin or trypsin-EDTA solution, which we would use for the cell release according the classical procedure. Finally, only a small volume of the solution is left in the flask in order to prevent the cell drying.The cell release is aided by incubation at 37oC and mild shaking the flask Pracoviště Fyziologický ústav Kontakt Lucie Trajhanová, lucie.trajhanova@fgu.cas.cz, Tel.: 241 062 400 Rok sběru 2009
Počet záznamů: 1