Počet záznamů: 1
Negative charge of the AC-to-Hly linking segment modulates calcium-dependent membrane activities of Bordetella adenylate cyclase toxin
- 1.
SYSNO ASEP 0531086 Druh ASEP J - Článek v odborném periodiku Zařazení RIV J - Článek v odborném periodiku Poddruh J Článek ve WOS Název Negative charge of the AC-to-Hly linking segment modulates calcium-dependent membrane activities of Bordetella adenylate cyclase toxin Tvůrce(i) Suková, Anna (MBU-M) ORCID
Bumba, Ladislav (MBU-M) RID, ORCID
Srb, Pavel (UOCHB-X) RID, ORCID
Veverka, Václav (UOCHB-X) RID, ORCID
Staněk, Ondřej (MBU-M) RID, ORCID
Holubová, Jana (MBU-M) RID, ORCID
Chmelík, Josef (MBU-M) RID, ORCID
Fišer, Radovan (MBU-M) RID, ORCID
Šebo, Peter (MBU-M) RID, ORCID
Mašín, Jiří (MBU-M) RID, ORCIDČíslo článku 183310 Zdroj.dok. Biochimica Et Biophysica Acta-Biomembranes. - : Elsevier - ISSN 0005-2736
Roč. 1862, č. 9 (2020)Poč.str. 14 s. Jazyk dok. eng - angličtina Země vyd. NL - Nizozemsko Klíč. slova Adenylate cyclase toxin ; AC-to-Hly linking segment ; Membrane penetration Vědní obor RIV CE - Biochemie Obor OECD Biochemistry and molecular biology Vědní obor RIV – spolupráce Ústav organické chemie a biochemie - Biochemie CEP GA19-04607S GA ČR - Grantová agentura ČR GA19-15175S GA ČR - Grantová agentura ČR GA18-20621S GA ČR - Grantová agentura ČR LO1509 GA MŠMT - Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy LM2018133 GA MŠMT - Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy LO1304 GA MŠMT - Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy Způsob publikování Omezený přístup Institucionální podpora MBU-M - RVO:61388971 ; UOCHB-X - RVO:61388963 UT WOS 000540854800012 EID SCOPUS 85083746018 DOI 10.1016/j.bbamem.2020.183310 Anotace Two distinct conformers of the adenylate cyclase toxin (CyaA) appear to accomplish its two parallel activities within target cell membrane. The translocating conformer would deliver the N-terminal adenylyl cyclase (AC) enzyme domain across plasma membrane into cytosol of cells, while the pore precursor conformer would assemble into oligomeric cation-selective pores and permeabilize cellular membrane. Both toxin activities then involve a membrane-interacting 'AC-to-Hly-linking segment' (residues 400 to 500). Here, we report the NMR structure of the corresponding CyaA(411-490) polypeptide in dodecylphosphocholine micelles and show that it consists of two alpha-helices linked by an unrestrained loop. The N-terminal alpha-helix (Gly418 to His439) remained solvent accessible, while the C-terminal alpha-helix (His457 to Phe485) was fully enclosed within detergent micelles. CyaA(411-490) weakly bound Ca2+ ions (apparent K-D 2.6 mM) and permeabilized negatively charged lipid vesicles. At high concentrations (10 mu M) the CyaA(411-490) polypeptide formed stable conductance units in artificial lipid bilayers with applied voltage, suggesting its possible transmembrane orientation in the membrane-inserted toxin. Mutagenesis revealed that two clusters of negatively charged residues within the 'AC-to-Hly-linking segment' (Glu419 to Glu432 and Asp445 to Glu448) regulate the balance between the AC domain translocating and pore-forming capacities of CyaA in function of calcium concentration. Pracoviště Mikrobiologický ústav Kontakt Eliška Spurná, eliska.spurna@biomed.cas.cz, Tel.: 241 062 231 Rok sběru 2020 Elektronická adresa https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0005273620301413
Počet záznamů: 1