Plasmidy exprimující rekombinantní proteiny hAPP-IgG a hAPLP2-IgG

0354949 - ÚMG 2011 RIV CZ cze L - Prototyp, funkční vzorek
Anděra, Ladislav
Plasmidy exprimující rekombinantní proteiny hAPP-IgG a hAPLP2-IgG.
[Plasmids expressing recombinant proteins hAPP-IgG a hAPLP2-IgG.]
Interní kód: hAAP-IgG, hAPLP2-IgG ; 2009
Technické parametry: Plasmidy exprimující rekombinantní proteiny hAPP-IgG a hAPLP2-IgG, výsledek byl ověřen pro zavedení do výroby
Ekonomické parametry: výsledek připraven ke komerčnímu využití na základě smlouvy o předání výsledku realizátorovi
Grant CEP: GA MŠMT 1M0506
Výzkumný záměr: CEZ:AV0Z50520514
Klíčová slova: APP * expression plasmid * amyloid
Kód oboru RIV: EB - Genetika a molekulární biologie

Plasmidy exprimující N-koncové části proteinů APP (aminokyseliny 1-344 a 1-670 ) a APLP2 (aminokyseliny 1-305 a 1-650 ) fúzované s C-koncovou částí obsahující konstantní část těžkého řetězce lidského IgG byly připraveny standardními metodami molekulární biologie. Rekombinantní fúzní proteiny jsou exprimovatelné v savčích buňkách (např.HEK293T, CHO) buď po jejich transientní transfekci rekombinantními plasmidy nebo jako připravené buněčné klony stabilně exprimující tyto proteiny. Exprese rekombinantních proteinů byla ověřena po transientní expresi v HEK293T buňkách: Western blotingovou analýzou pomocí anti-human IgG protilátky, SDS elektroforézou a barvením gelu pomocí CBB-R250 (ověření velikosti a čistoty rekombinantích proteinů). Rekombinantí APP- a APLP2 fúzní proteiny jsou vhodné jako antigeny pro přípravu komerčně využitelných anti-APP či APLP2 monoklonálních či polyklonálních protilátek.

Plasmids expressing N-terminal portions of APP proteins (amino acids 1-344 and 1-670 ) and APLP2 (amino acids 1-305 and 1-650 ) fused with the C-terminal portion of the constant domain of human IgG heavy chain were prepared by standard molecular biology methods.. Fusion recombinant proteins can be expressed in mammalian cells (e.g. HEK293T, CHO) after their trasient transfection with recombinant plasmids or as cell clones stably expressing these proteins. Expression of the recombinant proteins was confirmed after transient expression in HEK293T cells: by Western blotting using anti-human IgG antibodies, SDS electrophoresis and gel staining with CBB-R250 (verification of size and purity of the recombinant proteins). Recombinant APP- and APLP2 fusion proteins can be used as antigens for preparation of commercially exploitable anti-APP or APLP2 monoclonal or polyclonal antibodies.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0193837