Počet záznamů: 1
Simplified PCR-Based Quantification of Proteins with DNA Aptamers and Methylcellulose as a Blocking Agent
- 1.
SYSNO ASEP 0581638 Druh ASEP J - Článek v odborném periodiku Zařazení RIV J - Článek v odborném periodiku Poddruh J Článek ve WOS Název Simplified PCR-Based Quantification of Proteins with DNA Aptamers and Methylcellulose as a Blocking Agent Tvůrce(i) Redčenko, Oleksij (UMG-J)
Tůmová, Magda (UMG-J)
Dráber, Petr (UMG-J) RIDCelkový počet autorů 0 Číslo článku 347 Zdroj.dok. International Journal of Molecular Sciences. - : MDPI - ISSN 1661-6596
Roč. 25, č. 1 (2024)Poč.str. 16 s. Jazyk dok. eng - angličtina Země vyd. CH - Švýcarsko Klíč. slova blocking agents ; DNA aptamers ; immunoglobulins ; methylcellulose ; polymerase chain reaction ; polypropylene wells Obor OECD Biochemistry and molecular biology CEP TG01010066 GA TA ČR - Technologická agentura ČR TP01010060 GA TA ČR - Technologická agentura ČR TA01010436 GA TA ČR - Technologická agentura ČR GA23-07736S GA ČR - Grantová agentura ČR FV20479 GA MPO - Ministerstvo průmyslu a obchodu LM2023052 GA MŠMT - Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy Způsob publikování Open access Institucionální podpora UMG-J - RVO:68378050 UT WOS 001140642900001 EID SCOPUS 85181928830 DOI 10.3390/ijms25010347 Anotace Due to their unique three-dimensional structure, DNA or RNA oligonucleotide aptamers bind to various molecules with high affinity and specificity. Aptamers, alone or in combination with antibodies, can be used to sensitively quantify target molecules by quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR). However, the assays are often complicated and unreliable. In this study, we explored the feasibility of performing the entire assay on wells of routinely used polypropylene PCR plates. We found that polypropylene wells efficiently bind proteins. This allows the entire assay to be run in a single well. To minimize nonspecific binding of the assay components to the polypropylene wells, we tested various blocking agents and identified methylcellulose as an effective alternative to the commonly used BSA. Methylcellulose not only demonstrates comparable or superior blocking capabilities but also offers the advantage of a well-defined composition and non-animal origin. Our findings support the utilization of aptamers, either alone or in combination with antibodies, for sensitive quantification of selected molecules immobilized in polypropylene PCR wells in a streamlined one-well qPCR assay under well-defined conditions. Pracoviště Ústav molekulární genetiky Kontakt Nikol Škňouřilová, nikol.sknourilova@img.cas.cz, Tel.: 241 063 217 Rok sběru 2025 Elektronická adresa https://mdpi.com/1422-0067/25/1/347
Počet záznamů: 1