Počet záznamů: 1
Production of recombinant human ameloblastin by a fully native purification pathway
- 1.
SYSNO ASEP 0558955 Druh ASEP J - Článek v odborném periodiku Zařazení RIV J - Článek v odborném periodiku Poddruh J Článek ve WOS Název Production of recombinant human ameloblastin by a fully native purification pathway Tvůrce(i) Vetýšková, Veronika (UOCHB-X) ORCID
Zouharová, Monika (UOCHB-X) ORCID
Boušová, Kristýna (UOCHB-X) ORCIDČíslo článku 106133 Zdroj.dok. Protein Expression and Purification. - : Elsevier - ISSN 1046-5928
Roč. 198, October (2022)Poč.str. 6 s. Jazyk dok. eng - angličtina Země vyd. US - Spojené státy americké Klíč. slova ameloblastin ; oligomerization ; protein native conditions ; purification ; twin strep-tag Obor OECD Biochemistry and molecular biology CEP EF16_019/0000729 GA MŠMT - Ministerstvo školství, mládeže a tělovýchovy Způsob publikování Omezený přístup Institucionální podpora UOCHB-X - RVO:61388963 UT WOS 000826774100001 EID SCOPUS 85132738857 DOI 10.1016/j.pep.2022.106133 Anotace Ameloblastin (Ambn) is an intrinsically disordered protein (IDP) with a specific function of forming heterogenous homooligomers. The oligomeric function is led through a specific sequence encoded by exon 5 of Ambn. Due to the IDP character of Ambn to form oligomers, protein purification is subject to many challenges. Human ameloblastin (AMBN) and its two isoforms, I and II have already been purified as a recombinant protein in a bacterial expression system and functionally characterized in vitro. However, here we present a new purification protocol for the production of native AMBN in its original formation as a homooligomeric heterogeneous IDP. The purification process consists of three chromatographic steps utilizing His-tag and Twin Strep-tag affinity chromatography, along with size exclusion and reverse affinity chromatography. The presented workflow offers the production of AMBN in sufficient yield for in vitro protein characterizations and can be used to produce both AMBN isoforms I and II. Pracoviště Ústav organické chemie a biochemie Kontakt asep@uochb.cas.cz ; Kateřina Šperková, Tel.: 232 002 584 ; Jana Procházková, Tel.: 220 183 418 Rok sběru 2023 Elektronická adresa https://doi.org/10.1016/j.pep.2022.106133
Počet záznamů: 1