Plazmonické nanočástice pro in vitro diagnostiku

0532522 - ÚOCHB 2021 RIV CZ cze L - Prototyp, funkční vzorek
Cígler, Petr - Neburková, Jitka - Schimer, Jiří - Guricová, Miroslava - Hajdúch, M. - Jaworek, H. - Ondra, M. - Kubíčková, A.
Plazmonické nanočástice pro in vitro diagnostiku.
[Plasmonic nanoparticles for in vitro diagnostics.]
Interní kód: MG225 ; 2020
Technické parametry: Funkční vzorek je vodný koloidní roztok zlatých nanoskořápek se silikagelovým jádrem potažených polymerní vrstvou, která je tvořena kopolymerem připraveným z monomerů N-(2-hydroxypropyl)- methakrylamidu a propargyl-methakrylamidu. Na polymer je navázán pomocí triazolových spojek biotin a povrch je terminován neutravidinem, který je přítomen v nadbytku vůči biotinu. Funkční vzorek slouží k detekci lidského papilomaviru (HPV16) v buňkách cervikálního karcinomu pomocí in situ hybridizace virové DNA. Detekce pomocí funkčního vzorku je založená na následujícím postupu: fixované buňky anebo přímo nádorová tkáň jsou imobilizované na sklíčko, DNA je denaturována a hybridizována genově specifickou DNA sondou značenou digoxigeninem. Přebytek sondy je odmyt, buňky jsou dále inkubovány s králičí protilátkou proti digoxigeninu a následně biotinylovanou protilátkou proti králičím imunoglobulinům. Buňky jsou poté inkubovány s funkčním vzorkem zlatých nanoskořápek, které nesou na svém povrchu neutravidin. Po reakci s biotinylovanou protilátkou je nadbytek částic odmyt. Specifický signál HPV16 je vizualizován pomocí mikroskopie ve světlém poli jako tmavé, vysoce kontrastní skvrny na světlém pozadí lokalizované v oblasti buněčného jádra.
Ekonomické parametry: Funkční vzorek realizovaný při řešení grantu, s předpokladem smluvního využití s vědeckým a ekonomickým přínosem.
Grant CEP: GA MPO(CZ) FV10755
Institucionální podpora: RVO:61388963
Klíčová slova: in vitro diagnostics * gold nanoshells * polymer coating
Obor OECD: Physiology (including cytology)

Funkční vzorek „Plazmonické nanočástice pro in vitro diagnostiku“ obsahuje zlaté nanoskořápky s povrchovou polymerní modifikací a slouží pro in vitro diagnostické účely v humánní medicíně. Jedná se o vodný roztok zlatých nanoskořápek se silikagelovým jádrem potažených polymerní vrstvou terminovanou neutravidinem. Funkční vzorek je určený především k detekci lidského papilomaviru (HPV16) v buňkách cervikálního karcinomu pomocí in situ hybridizace virové DNA. Specifický signál HPV16 je vizualizován pomocí mikroskopie ve světlém poli jako tmavé, vysoce kontrastní skvrny lokalizované v oblasti buněčného jádra.

Functional sample „Plasmonic nanoparticles for in vitro diagnostics“ contains gold nanoshells with surface polymer modification and is used for in vitro diagnostic purposes in human medicine. The sample is an aqueous solution of gold nanoshells with silica core, coated with polymer layer terminated with neutravidin. The purpose of the functional sample is mainly detection of human papillomavirus (HPV16) in cells of cervical cancer using in situ hybridization of viral DNA. The specific signal of HPV16 is vizualized using brightfield microscopy as dark, high contrasting spots localized around cell nucleus.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0310990