Rekombinantní protein – Toxin Epsilon typ B (Clostridium perfringens)

0477715 - BTÚ 2018 RIV CZ cze L - Prototyp, funkční vzorek
Vaňková, Lucie - Malý, Petr
Rekombinantní protein – Toxin Epsilon typ B (Clostridium perfringens).
[Recombinant protein – Epsilon-toxin type B (Clostridium perfringens).]
Interní kód: S17BTU0151 ; 2017
Technické parametry: Dokumentace s technologickým popisem produkce, purifikace, sekvenční identifikace a charakterizace každého typu vazebného proteinu.
Ekonomické parametry: podpora vývoje veterinární vakcíny
Grant CEP: GA TA ČR(CZ) TH01010837
Institucionální podpora: RVO:86652036
Klíčová slova: bacterial toxin * veterinary vaccine * ELISA * recombinant protein
Obor OECD: Veterinary science

Molekulárním klonováním byl sestrojen rekombinantní plasmid nesoucí cDNA sekvenci toxinu Epsilon typu B baktérie C.perfringens, kódujícího protein bez signální sekvence a pro-peptidu (pozice 46-328) s přidaným N-koncovým 6xHis-tagem. Plasmid byl použit k produkci proteinu o délce 298 aminokyselin o celkové velikosti 33,2 kDa. Ověření proteinu bylo provedeno pomocí ELISA, SDS-PAGE a Western blotu. Protein může být použit k diagnostickému průkazu přítomnosti protilátek v séru a kolostru imunizovaných zvířat metodou ELISA.

Molecular cloning was used to construct a recombinant plasmid vector carrying cDNA of Epsilon-toxin type B (C.perfringens), coding for amino acid sequence lacking the leader peptide and pro-peptide (46-328), with installed 6xHistidine tag at the N-terminus. This plasmid vector produces protein of 298 amino acid residues and the molecular weight 33.2 kDa. Protein identity was confirmed by SDS-PAGE, Western blot and ELISA. This recombinant protein can be used for the investigation of antibody level in serum and colostrum of immunized animals by ELISA method.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0274091