Rekombinantní protein – Toxin Beta2 (Clostridium perfringens)

0477714 - BTÚ 2018 RIV CZ cze L - Prototyp, funkční vzorek
Vaňková, Lucie - Malý, Petr
Rekombinantní protein – Toxin Beta2 (Clostridium perfringens).
[Recombinant protein – Beta2-Toxin (Clostridium perfringens).]
Interní kód: S17BTU0150 ; 2017
Technické parametry: Dokumentace s technologickým popisem produkce, purifikace, sekvenční identifikace a charakterizace každého typu vazebného proteinu.
Ekonomické parametry: podpora vývoje veterinární vakcíny
Grant CEP: GA TA ČR(CZ) TH01010837
Institucionální podpora: RVO:86652036
Klíčová slova: bacterial toxin * veterinary vaccine * ELISA * recombinant protein
Obor OECD: Veterinary science

Molekulárním klonováním byl sestrojen rekombinantní plasmid nesoucí cDNA sekvenci toxinu Beta2 baktérie C.perfringens (Cpb2), kódujícího protein bez signálního peptidu (pozice 31-265) upraveným N-koncovým 6xHis-tagem. Plasmid byl použit k produkci proteinu o délce 250 aminokyselin o celkové velikosti 29 kDa. Ověření proteinu bylo provedeno pomocí ELISA, SDS-PAGE a Western blotu. Protein může být použit k diagnostickému průkazu přítomnosti protilátek v séru a kolostru imunizovaných zvířat metodou ELISA.

Molecular cloning was used to construct a recombinant plasmid vector carrying cDNA of Beta2-toxin (C.perfringens), coding for amino acid sequence lacking the leader peptide (31-265), with installed 6xHistidine tag at the N-terminus. This plasmid vector produces protein of 250 amino acid residues and the molecular weight 29 kDa. Protein identity was confirmed by SDS-PAGE, Western blot and ELISA. This recombinant protein can be used for the investigation of antibody level in serum and colostrum of immunized animals by ELISA method.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0274090