Rekombinantní protein – Toxin Alfa (Clostridium perfringens)

0477712 - BTÚ 2018 RIV CZ cze L - Prototyp, funkční vzorek
Vaňková, Lucie - Malý, Petr
Rekombinantní protein – Toxin Alfa (Clostridium perfringens).
[Recombinant protein – Toxin Alpha (Clostridium perfringens).]
Interní kód: S17BTU0148 ; 2017
Technické parametry: Dokumentace s technologickým popisem produkce, purifikace, sekvenční identifikace a charakterizace každého typu vazebného proteinu.
Ekonomické parametry: podpora vývoje veterinární vakcíny
Grant CEP: GA TA ČR(CZ) TH01010837
Institucionální podpora: RVO:86652036
Klíčová slova: bacterial toxin * Phospholipase C * Hemolysin * veterinary vaccine * ELISA
Obor OECD: Veterinary science

Molekulárním klonováním byl sestrojen rekombinantní plasmid nesoucí cDNA sekvenci toxinu Alfa baktérie C.perfringens (Fosfolipáza C, Hemolysin), kódujícího C-terminální doménu (275-398) s flexibilním linkerem a N-koncovým 6xHis-tagem. Plasmid byl použit k produkci proteinu o délce 134 aminokyselin a celkové velikosti 15,4 kDa. Ověření proteinu bylo provedeno pomocí ELISA, SDS-PAGE a Western blotu. Protein může být použit k diagnostickému průkazu přítomnosti protilátek v séru a kolostru imunizovaných zvířat metodou ELISA.

Molecular cloning was used to construct a recombinant plasmid vector carrying cDNA of Alpha-toxin (C.perfringens), coding for C-terminal domain (275-398) with a flexible linker and 6xHistidine tag at the N-terminus. This plasmid vector produces protein of 134 amino acid residues and the molecular weight 15.4 kDa. Protein identity was confirmed by SDS-PAGE, Western blot and ELISA. This recombinant protein can be used for the investigation of antibody level in serum and colostrum of immunized animals by ELISA method.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0274088