Rekombinantní protein – K99 fimbriální protein (E. coli)

0477649 - BTÚ 2018 RIV CZ cze L - Prototyp, funkční vzorek
Petroková, Hana - Malý, Petr
Rekombinantní protein – K99 fimbriální protein (E. coli).
[Recombinant protein – K99 fimbrial protein (E. coli).]
Interní kód: S17BTU0144 ; 2017
Technické parametry: Dokumentace s technologickým popisem produkce, purifikace, sekvenační identifikace a charakterizace každého typu vazebného proteinu.
Ekonomické parametry: podpora vývoje veterinární vakcíny
Grant CEP: GA TA ČR(CZ) TH01010837
Institucionální podpora: RVO:86652036
Klíčová slova: fimbrial protein * ELISA * recombinant adhesin * veterinary vaccine
Obor OECD: Veterinary science

Molekulárním klonováním byl sestrojen rekombinantní plasmid nesoucí cDNA sekvenci K99 fimbriálního proteinu baktérie E.coli (Adhesinu K99), kódujícího celý protein bez signální sekvence (23-181) a N-koncový 6xHis-tag. Plasmid byl použit k produkci proteinu o délce 174 aminokyselin a celkové velikosti 18.1 kDa. Ověření proteinu bylo provedeno pomocí ELISA, SDS-PAGE a Western blotu. Protein může být použit k diagnostickému průkazu přítomnosti protilátek v séru a kolostru imunizovaných zvířat metodou ELISA.

Molecular cloning was used to construct a recombinant plasmid vector carrying cDNA of K99 fimbrial protein (E.coli), coding for a full-length K99 protein lacking the leader peptide sequence (23-181), and modified by 6xHistidin tag at the N-terminus. This plasmid vector produces 174 amino acid protein of the molecular weight 18.1 kDa. Protein identity were confirmed by SDS-PAGE, Western blot and ELISA. This recombinant protein can be used for the investigation of antibody level in serum and colostrum of immunized animals.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0273942