Využití izoelektrické fokusace v rozbíhavém toku a kapilární reverzně-fázové kapalinové chromatografie při separaci modelové směsi peptidů

0372676 - ÚIACH 2012 RIV CZ cze K - Konferenční příspěvek (tuzemská konf.)
Duša, Filip - Moravcová, Dana - Kahle, Vladislav - Šlais, Karel
Využití izoelektrické fokusace v rozbíhavém toku a kapilární reverzně-fázové kapalinové chromatografie při separaci modelové směsi peptidů.
[Using of divergent flow isoelectric focusing and capillary liquid.]
Monitorování cizorodých látek v životním prostředí XIII. Pardubice: Univerzita Pardubice, 2011 - (Česla, P.; Fischer, J.; Vytřas, K.), s. 35-44. ISBN 978-80-7395-450-5.
[Monitorování látek v životním prostředí /8./. Luka nad Jihlavou (CZ), 20.09.2011-22.09.2011]
Grant CEP: GA AV ČR IAAX00310701; GA MŠMT LC06023
Výzkumný záměr: CEZ:AV0Z40310501
Klíčová slova: peptides * DF-IEF * RPLC
Kód oboru RIV: CB - Analytická chemie, separace

Separace analytů z komplexních směsí dnes hraje významnou roli při jejich další identifikaci. V článku je navržena metoda dvoudimenzionální separace směsi tryptických peptidů hovězího sérového albuminu. V první dimenzi jsou peptidy rozděleny isoelektrickou fokusací v rozbíhavém toku a v druhé dimenzi následuje kapalinová chromatografie s reverzní fází. Díky charakteru vstupní směsi je možné u izoelektrické fokusace využít autofokusaci peptidů, tzn. fokusaci bez přídavku nosných amfolytů. Chromatogramy z druhé dimenze byly zpracovány do podoby vrstevnicové mapy. Získaná data ukázala dobrou separační účinnost izoelektrické fokusace a díky autofokusaci bylo možné rozdělit i peptidy s blízkými izoelektrickými body.

Separation of analytes from complex matrices play important role in their further identification. In this article we propose two-dimensional separation method of bovine serum albumin tryptic peptides. At the first dimension peptides are separated by divergent flow isoelectric focusing followed by reverse-phase liquid chromatography as the second dimension. Due to composition of input mixture it is possible to use autofocusing mode in first dimension. In this mode peptides are focused without addition of carrier ampholytes. Chromatograms from the second dimension were processed into contour map. Acquired data showed good separation efficiency of isoelectric focusing. Autofocusing mode enabled better resolution of peptides with close isoelectric points.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0205932