Expresní vektor, pET28b ABD-TolA-288, kódující interferon gama vazebný protein odvozený z albumin-vázající domény proteinu G bakterie Streptococcus G148

0326948 - MBÚ 2010 RIV CZ cze L - Prototyp, funkční vzorek
Ahmad, Jawid Nazir - Osička, Radim - Šebo, Peter
Expresní vektor, pET28b ABD-TolA-288, kódující interferon gama vazebný protein odvozený z albumin-vázající domény proteinu G bakterie Streptococcus G148.
[Expression vector, pET28b ABD-TolA-288, coding interferon gamma binding protein derived from the albumin binding domain of protein G of Streptococcus G148.]
Interní kód: pET28b ABD-TolA-288 ; 2009
Technické parametry: Plazmidový rekombinantní DNA konstrukt pro produkci proteinu vázajícího interferon gama
Ekonomické parametry: Produkce rekombinantních proteinů pro imunologická stanovení v ČR a na export
Grant CEP: GA AV ČR KAN200520702
Výzkumný záměr: CEZ:AV0Z50200510
Klíčová slova: pET28b ABD-TolA-288
Kód oboru RIV: EE - Mikrobiologie, virologie

Ribozomální display je in vitro technologie používaná k selekci a evoluci proteinů nebo peptidů vázajících danou cílovou molekulu. V této práci byla metoda použita k selekci proteinů vázajících interferon gama (IFNg), který je používán jako marker při diagnóze jinak obtížně detekovatelných onemocnění, např. latentní tuberkulózy. K vývoji artificiálního proteinu vázajícího IFNg bylo jako matrice použito albumin-vázající domény (ABD) proteinu G bakterie Streptococcus. ABD knihovna zkonstruovaná na základě racionálního návrhu byla za použití technologie ribozomálního display podrobena selekci proti IFNg a u získaných vazebných proteinů s vysokou afinitou byla testována jejich stabilita a specifita. Nejlepší vazebné proteiny získané pomocí této metody vykazovaly afinitu k IFNg v nanomolární oblasti a reprezentují tak molekuly, které by se mohly uplatnit v diagnostické detekci IFNg

Ribosome display is an in vitro technology for the simultaneous selection and evolution of proteins or peptides binding to a given target. In this work, it was applied for selection of high affinity binders targeting interferon gamma (IFNg) that is used as a marker in the diagnosis of otherwise hardly detectable diseases, e.g. latent tuberculosis. The albumin binding domain (ABD) of Streptococcal protein G was used as a scaffold for deriving artificial binding protein for IFNg. The ABD library constructed based on the rational design was subjected to selection against IFNg using ribosome display technology and the selected high affinity variants were tested for stability and specificity. The best binders selected using this strategy display an affinity towards IFNg in the nanomolar range and therefore represent molecules with promising applications in the diagnostic detection of IFNg
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0173871