Deregulation of acetohydroxy-acid synthase: loss of allosteric inhibition conferred by mutations in the catalytic subunit

0320746 - MBÚ 2009 RIV CZ eng J - Článek v odborném periodiku
Kopecký, Jan - Kyselková, Martina - Šigutová, Lucie - Pospíšil, Stanislav - Felsberg, Jürgen - Spížek, Jaroslav - Janata, Jiří
Deregulation of acetohydroxy-acid synthase: loss of allosteric inhibition conferred by mutations in the catalytic subunit.
[Deregulace syntázy kyseliny hydroxyoctové: ztráta alosterické inhibice zapřičiněná mutací v katalytické podjednotce.]
Folia Microbiologica. Roč. 53, č. 6 (2008), s. 467-471. ISSN 0015-5632. E-ISSN 1874-9356
Grant CEP: GA ČR GA204/01/1001; GA ČR GA204/05/0616
Výzkumný záměr: CEZ:AV0Z50200510
Klíčová slova: acetohydroxy acid * ilvb genes * sequencing
Kód oboru RIV: EE - Mikrobiologie, virologie
Impakt faktor: 1.172, rok: 2008

The ilvB genes coding for acetohydroxy acid synthase (AHAS) catalytic subunit from the Streptomyces cinnamonensis parental strain and four mutants deregulated in valine biosynthesis were sequenced. Two changes in the sequence of IlvB conferring the AHAS insensitivity to valine were found in mutant strains: E139A and dQ217. Homology modeling revealed that the substitution E139A is located in a loop at the homodimer subunit-subunit interface near the TPP binding site while dQ217 is situated in a distant helix. Sequencing of ilvBNC upstream region revealed a sequence containing a putative attenuator. However, no mutation within this region was found in mutants with constitutively increased AHAS activity levels suggesting a different mechanism of deregulation

Byly osekvenovány geny ilvB kódující katalytickou podjednotku syntázy kyseliny hydroxyoctové (AHAS) ze Streptomyces cinamonensis a čtyř dalších mutant, blokovaných v biosyntéze valinu. V mutantních kmenech byly nalezeny dvě změny v genu IlvB, mající za následek ztrátu citlivosti AHAS k valinu: E139A a dQ217. Homologní modelování ukázalo, že substituce E139A je lokalizována ve smyčce v prostoru mezi podjednotkami homodimeru v blízkosti TPP vazebného místa. dQ217 je naproti tomu situována na vzdáleném helixu. Sekvenování oblasti proti směru přepisu ilvBNC odhalilo sekvenci obsahující pravděpodobný atenuátor, ovšem u mutantních kmenů s konstitutivně zvýšenou aktivitou AHAS nebyla v této oblasti žádná mutace nalezena. Na základě tohoto poznatku předpokládáme jiný mechanizmus deregulace
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0169525