E. coli expresní plasmidy produkující TRAIL-R1/DR4 a TRAIL-R2/DR5 specifické mutanty lidského ligandu TRAIL

0320648 - ÚMG 2009 RIV CZ cze L - Prototyp, funkční vzorek
Anděra, Ladislav
E. coli expresní plasmidy produkující TRAIL-R1/DR4 a TRAIL-R2/DR5 specifické mutanty lidského ligandu TRAIL.
[E. coli expression plasmids producing TRAIL-R1/DR4- and TRAIL-R2/DR5-specific mutant sof the human ligand TRAIL.]
Interní kód: pEThTRAIL-EC-DR4m, -DR5m ; 2008
Technické parametry: E. coli expresní vektory produkující His-tagované DR4 a DR5 specifické mutanty cytotoxického ligandu TRAIL
Ekonomické parametry: Výsledek připraven ke komerčnímu využití
Grant CEP: GA MŠMT 1M0506
Výzkumný záměr: CEZ:AV0Z50520514
Klíčová slova: TRAIL-R1/DR4 * TRAIL-R2/DR5 * expression vector
Kód oboru RIV: EB - Genetika a molekulární biologie

Pomocí řízené metageneze (Quickchange, Stratagene) byly v cDNA pro extracelulární část ligandu TRAIL (aminokyseliny 95-281) cíleně mutovány dvě (DR5 specifický mutant), respektive čtyři (DR4 specifický mutant) aminokyseliny a po sekvenčním ověření vnesených mutací byla exprese mutovaných proteinů po překlonování do prokaryotického expresního vektoru oveřena v E. coli (BL21)

Using site-directed mutagenesis (Quickchange, Stratagene) were into cDNA encoding the extracellular part of the ligand TRAIL (amino acids 95-281) introduced two (DR5 specific) and four (DR4 specific) point mutations. Introduced mutations were verified by sequencing and the mutated TRAILs were after subcloning into an E. coli expression plasmid produced in E. coli(BL21) and purified.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0169459