Metodický postup čištění virů pomocí polyethylenglykolu (PEG) a sacharózového gradientu

0310687 - ÚIACH 2009 RIV CZ cze L3 - Certifikované metodiky
Kubíček, O. - Kubíčková, Z. - Rosenbergová, K. - Horká, Marie
Metodický postup čištění virů pomocí polyethylenglykolu (PEG) a sacharózového gradientu.
[Virus cleaning on sucrose gradient after polyethylene glycol (PEG) precipitation.]
Interní kód: čištění viru PEG sach gradient ; 2008
Technické parametry: Metoda je vyvinuta pro čištění viru bez potřeby ultracentrifugy
Ekonomické parametry: Metoda je využívána pro státní správu.
Certifikační orgán: Laboratoř biologického monitorování a ochrany. Datum certifikace: 26.06.2008
Grant CEP: GA AV ČR IAAX00310701
Výzkumný záměr: CEZ:AV0Z40310501
Klíčová slova: virus cleaning * polyethylene glycol * sucrose gradient
Kód oboru RIV: CB - Analytická chemie, separace

Prvním krokem je odstranění větších nečistot, baktérií a buněk první centrifugací. poté je k supernatantu obsahujícímu virus přidán PEG a NaCl. Působením PEG a iontové síly NaCl dojde k vysrážení viru, který následně sedimentuje při centrifugaci již při zrychlení okolo 10000g. Na sacharózovém gradientu dojde k vyčištění viru od nečistot odlišné hustoty.

First centrifugation removes bigger impurities. Viruses contained in supernatant will be precipitated PEG and NaCl. Precipitated viruses settled already in acceleration about 10000g. The impurities with different density will be removed on the sucrose gradient.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0162473