Křeččí buněčná linie CHO produkující funkční rekombinantní ligand Wnt3a

0083195 - ÚMG 2007 RIV CZ cze L - Prototyp, funkční vzorek
Kořínek, Vladimír
Křeččí buněčná linie CHO produkující funkční rekombinantní ligand Wnt3a.
[Hamster cell line CHO producing functional recombinant ligand Wnt3a.]
Interní kód: Wnt3a-CHO-E10 ; 2007
Technické parametry: Křeččí buněčná linie Wnt3a-CHO-E10 se stabilně integrovaným plasmidem, který exprimuje ligand Wnt3a
Ekonomické parametry: linie má ověřenou komerční hodnotu
Grant CEP: GA MŠMT 1M0506
Výzkumný záměr: CEZ:AV0Z50520514
Klíčová slova: CHO cell line * Wnt3a * stem cells
Kód oboru RIV: EB - Genetika a molekulární biologie

Pomocní molekulárně biologických metod byl připraven expresní plasmid kódující myší sekretovaný protein Wnt3a. Tento plasmid byl transfekcí zaveden do křeččích buněk. Jednotlivé klony těchto buněk byly selektovány kultivací v růstovém médiu obsahující selekční antibiotikum (G418; expresní plasmid kóduje gen pro rezistenci vůči tomuto antibiotiku). Byl vyselektován buněčný klon Wnt3a-CHO-E10 produkující funkční ligand Wnt3a. Tento ligand je možné izolovat z kultivačního média za podmínek, při kterých je zachována jeho biologická aktivita. Wnt3a byl popsán jako růstový faktor nezbytný pro dlouhodobé přežívání krevních kmenových v kultuře. Linie Wnt3a-CHO-E10 je tedy vhodným zdrojem pro produkci většího množství tohoto proteinu. Ten je pak možné využít v řadě důležitých aplikací jako například při izolaci kmenových buněk různého původu.

Using standard molecular biological techniques we prepared a clone of Chinese hamster ovary cells producing mouse recombinant protein Wnt3a. The protein can be purified from the culture supernatant under such conditions that it retains its biological activity. Thus, Wnt3a-CHO-E10 cells are a valuable source of the Wnt3a protein. This protein can be subsequently used as a growth factor for stem cells of different origin.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0146516