Gene expression in bovine embryos derived from oocytes with different developmental competence collected at the defined follicular developmental stage

0040790 - ÚŽFG 2007 RIV US eng J - Článek v odborném periodiku
Němcová, Lucie - Machatková, M. - Hanzalová, K. - Horáková, J. - Kaňka, Jiří
Gene expression in bovine embryos derived from oocytes with different developmental competence collected at the defined follicular developmental stage.
[Exprese genů u embryí skotu získaných z oocytů s rozdílnou vývojovou kompetencí, izolovaných v definovaném stadiu folikulárního vývoje.]
Theriogenelogy. Roč. 65, 7 (2006), s. 1254-1264. ISSN 0093-691X. E-ISSN 1879-3231
Grant CEP: GA ČR GA524/02/1135
Výzkumný záměr: CEZ:AV0Z50450515
Klíčová slova: cattle * follicular development * oocyte development
Kód oboru RIV: EB - Genetika a molekulární biologie
Impakt faktor: 1.898, rok: 2006

The aim of this study was to compare the expression of selected genes in bovine embryos developed from oocytes with different meiotic competence collected from different-sized follicles in two stages of follicular development. Oocyte subpopulations were collected from the ovaries of individual donors, separately from small and medium follicles, either in the growth/stagnation (G/S) or dominance/regression (D/R) stage. They were matured, fertilized and cultured to D7 or D8 blastocysts by the standard protocol. Poly (A)+ mRNA was extracted from pooled blastocysts and the expression of bax-α (Bax), connexin 43 (Cx 43) and connexin 31 (Cx 31) was estimated using real-time RT-PCR. The cleavage rates were significantly higher in oocytes collected from both medium and small follicles, (pŁ 0.05 and pŁ 0.01, respectively) in the G/S than in the D/R stage. There were no significant differences in the D7 blastocyst rates between oocytes from both medium and small follicles in the G/S or D/R stage. But the D8 blastocyst rate was significantly higher in oocytes from small follicles in the G/S stage compared with those in the D/R stage. The relative abundance of Bax and Cx 31 made no significant difference in D7 and D8 blastocysts developed from oocytes collected from both medium and small follicles in the G/S or D/R stage. But the relative abundance of the Cx 43 transcript was significantly higher in D8 blastocysts developed from oocytes collected from both medium and small follicles in the G/S stage compared with those in the D/R stage. We conclude that the relative abundance of Cx 43 can be used as a marker of blastocyst formation for oocytes with different meiotic competence because the level of Cx 43 transcript was greater in embryos derived from oocytes with greater meiotic competence.

Cílem této studie bylo srovnat expresy vybraných genů u bovinních embryí vyvíjejících se z oocytů s rozdílnou vývojovou kompetencí. Čtyři populace oocytů byly izolovány, buď z malých (2-5 mm) nebo středních (6-10 mm) folikulů, ve stadiu růstu/stagnace (G/S), nebo dominance/regrese (D/R) první folikulární vlny. Oocyty byly dozrávány, oplozeny a kultivovány podle standardního protokolu do stadií D7 nebo D8 blastocyst. Poly(A)+ mRNA byla izolována ze skupin oocytů a exprese bax α (Bax), connexinu 43 (Cx43) a connexinu 31 (Cx31) byla měřena pomocí real-time RT-PCR. Procento dělení bylo signifikantně vyšší u oocytů, izolovaných ze středních a malých folikulů (p Ł 0,05 a p Ł 0,01) v G/S než v D/R stadiu. Relativní obsah Bax a Cx31 se výrazně nelišil u D7 a D8 blastocyst, které se vyvinuly z oocytů izolovaných ze středních a malých folikulů v G/S stadiu než těmi v D/R stadiu. Avšak relativní obsah Cx43 transkriptu byl významně vyšší u D8 blastocyst, které se vyvinuly z oocytů izolovaných ze středních a malých folikulů v G/S stadiu než těmi v D/R stadiu. Z toho vyvozujeme, že relativní výskyt Cx43 může být použit jako markr vývojové kompetence embryí, která se vyvinula z oocytů s různou vývojovou kompetencí, neboť úroveň transkriptu Cx43 byla vyšší u embryí získaných z oocytů s větší vývojovou kompetencí.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0134434