Number of the records: 1  

Expresní vektor, pSPM-His, kódující samoštěpitelný afinitní modul odvozený z proteinu FrpC bakterie Neisseria meningitidis určený pro jednostupňovou purifikaci rekombinantních proteinů na Ni-NTA agarose

  1. 1.
    SYSNO ASEP0312749
    Document TypeL - Prototype, Functional Specimen
    R&D Document TypePrototype, Functional Specimen
    RIV SubspeciesFunctional Specimen
    TitleExpresní vektor, pSPM-His, kódující samoštěpitelný afinitní modul odvozený z proteinu FrpC bakterie Neisseria meningitidis určený pro jednostupňovou purifikaci rekombinantních proteinů na Ni-NTA agarose
    TitleExpression vector, pSPM-His, coding self-processing affinity module derived from the FrpC protein of Neisseria meningitidis for single-step purification of free recombinant proteins on Ni-NTA agarose
    Author(s) Osička, Radim (MBU-M) RID, ORCID
    Sadílková, Lenka (MBU-M)
    Linhartová, Irena (MBU-M) RID, ORCID
    Šebo, Peter (MBU-M) RID, ORCID
    Year of issue2008
    Int.CodepSPM-His
    SResult web page, Location of the resultRealizátor výsledku Proteix s.r.o., Nad Safinou II/365, Vestec, 252 42 Jesenice u Prahy
    Technical parametersPlazmidový rekombinantní DNA konstrukt pro produkci a následnou purifikaci rekombinantních proteinů
    Economic parametersProdukce rekombinantních proteinů pro imunologická stanovení v ČR a na export
    Owner NameMikrobiologický ústav AV ČR, v. v. i., Vídeňská 1083, 142 20 Praha 4, ČR
    Registration Number of the result owner61388971
    Applied result category by the cost of its creationA - Vyčerpaná část nákladů <= 5 mil. Kč
    Use by another entityP - Využití výsledku jiným subjektem je v některých případech možné bez nabytí licence
    License fee feeZ - Poskytovatel licence nepožaduje v některých případech licenční poplatek
    Languagecze - Czech
    CountryCZ - Czech Republic
    KeywordspSPM-His
    Subject RIVEC - Immunology
    R&D ProjectsKAN200520702 GA AV ČR - Academy of Sciences of the Czech Republic (AV ČR)
    CEZAV0Z50200510 - MBU-M (2005-2011)
    AnnotationExpresní vektor pSPM-His nese DNA fragment kódující 250 aminokyselinových zbytků dlouhý samoštěpící modul (SPM) odvozený z proteinu FrpC bakterie Neisseria meningitidis. DNA fragment pro SPM je na 3-konci fúzován ve fázi čtení se sekvencí kódující šest histidinových zbytků (His) a na 5-konci s klonovacím místem (MCS). MCS bylo navrženo tak, aby do něj mohl být klonován gen pro libovolný rekombinantní protein ve fázi čtení se sekvencí pro SPM-His, což umožňuje produkci rekombinantního proteinu fúzovaného k SPM-His. Po produkci fúzního proteinu a jeho zachycení k Ni-NTA agarose z buněčného lyzátu jsou kontaminující proteiny odstraněny a pomocí vápenatých iontů je indukováno SPM-zprostředkované štěpení mezi rekombinantním proteinem a SPM-His. To vede k uvolnění čistého rekombinantního proteinu z matrice, na kterou zůstává navázán pouze fúzní partner SPM-His
    Description in EnglishThe expression vector pSPM-His harbors a DNA fragment encoding the 250 amino acid residues long self-processing module (SPM) of the FrpC protein of Neisseria meningitidis, which is fused in frame to a sequence coding for six histidine residues (His) at the 3-terminus and to a multiple cloning sequence (MCS) at the 5-terminus. The MCS was designed for insertion of a target gene in-frame with the gene for SPM- His, thus allowing the expression of a target protein fused to SPM-His. After expression of the fusion protein and its binding to Ni-NTA agarose from a cell lysate, contaminating proteins are washed out and the SPM-mediated cleavage between recombinant protein and SPM-His is induced by calcium ions. It results in release of the free recombinant protein, while the SPM-His fusion partner remains trapped on the affinity matrix
    WorkplaceInstitute of Microbiology
    ContactEliška Spurná, eliska.spurna@biomed.cas.cz, Tel.: 241 062 231
    Year of Publishing2009
Number of the records: 1  

  This site uses cookies to make them easier to browse. Learn more about how we use cookies.