0172345 - UEB-Q 20033112 RIV CZ cze J - Journal Article
Dobrev, Petre - Motyka, Václav
Stanovení aktivity cytokininoxidasy/dehydrogenasy v rostlinách pomocí HPLC spojené s průtokovým radioaktivním detektorem.
[Determination cytokininoxidase/dehydrogenase activity via HPLC jointed with flow radioactive detector in plants.]
Biologické Listy. Roč. 68, č. 3 (2003), s. 163-166. ISSN 0366-0486
R&D Projects: GA ČR GA206/03/0313; GA MŠMT LN00A081
Institutional research plan: CEZ:AV0Z5038910
Keywords : cytokinin oxidase/dehydrogenase * TLC * HPLC
Subject RIV: CE - Biochemistry

Je popsán postup stanovení aktivity cytokininoxidasy/dehydrogenasy (CKX) v rostlinách radioisotopovou metodou pomocí HPLC spojené s průtokovým radioaktivním detektorem. Aktivita CKX se stanovuje po inkubaci částečně purifikovaného proteinového extraktu s N6-(Δ2-isopentenyl)adeninem (iP) radioaktivně značeným v purinovém kruhu, následné chromatografické separaci pomocí HPLC (příp. TLC) a měření radioaktivity vzniklého produktu adeninu. V práci jsou uvedeny výhody a nevýhody stanovení aktivity CKX při měření konverse radioaktivně značeného iP pomocí HPLC spojené s on-line radioaktivním detektorem ve srovnání s TLC na mikrokrystalické celulóze.

The procedure for determination of cytokinin oxidase/dehydrogenase (CKX) activity in plants by radioisotope technique using HPLC coupled with on-line radioactivity detector is described. The CKX activity is being determined after incubation of partially purified protein extracts with the radioactive N6-(Δ2-isopentenyl)adenine (iP) labelled on the purine ring, chromatographic separation using HPLC (or TLC) and measurement of radioactivity of the product adenine. Advantages and disadvantages of determination of CKX activity by measuring the conversion of labelled iP by HPLC coupled with on-line radioactivity detector compared to TLC on microcrystalline cellulose are presented.
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0069384