Polyomavirus EGFP-pseudocapsids:analysis of model particles for introduction of proteins and pepetides into mammalian cells

0026205 - ÚMG 2006 RIV GB eng J - Journal Article
Bouřa, E. - Liebl, D. - Spíšek, R. - Frič, Jan - Marek, M. - Štokrová, Jitka - Holáň, Vladimír - Forstová, J.
Polyomavirus EGFP-pseudocapsids:analysis of model particles for introduction of proteins and pepetides into mammalian cells.
[Pseudokapsidy polyoma viru EGFP: analýza modelových partikulí pro vnášení proteinů a peptidů do savčích buněk.]
FEBS Letters. Roč. 579, č. 29 (2005), s. 6549-6558. ISSN 0014-5793. E-ISSN 1873-3468
R&D Projects: GA MZd(CZ) NC6957; GA ČR(CZ) GA204/03/0593
Institutional research plan: CEZ:AV0Z50520514
Keywords : mouse polyomavirus * empty artificial virus-like particle * dendritic cell activation
Subject RIV: EB - Genetics ; Molecular Biology
Impact factor: 3.415, year: 2005

A vector for preparation of mouse polyomavirus capsid-like particles for transfer of foreign peptides or proteins into cells was constructed. Model pseudocapsids carrying EGFP fused with the C-terimal part of the VP3 minor protein (EGFP-VLPs) have been prepared and analysed for their ability to be internalised and processed by mouse cells and to activate mouse and human dendritic cells (DC) in vitro. EGFP-VLPs entered mouse epithelial cells, fibroblasts and human and mouse DC efficiently and were processed by both, lysosomes and proteasomes. Surprisingly, they did not induce upregulation of DC co-stimulation molecules or maturation markers in vitro; however, they did induce interleukin 12 secretion.

Byl zkonstruován vektor myších polyomavirových kapsid-like částic pro přenos cizorodých peptidů a proteinů do buněk. Byly připraveny modelové pseudokapsidy nesoucí EGFP fuzovaný s C-terminální částí minoritního proteinu VP3 (EGFP-VPLs) a byla analyzována jejich schopnost internalizace a zpracování myšími buňkami jakož i schopnost aktivace myších a lidských dendritických buněk in vitro. EGFP-VPLs účinně pronikly do myších epiteliálních buněk, fibroblastů a lidských i myších dendritických buněk a byly upravovány jak lysozomy tak proteazomy. Překvapivě však neindukovaly stimulaci molekul a maturačních markerů in vitro, ale indukovaly sekreci interleukinu 12.
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0116490