Number of the records: 1
Plazmid pro účinnou expresi rekombinatní myší IgG protilátky Bg1, která má inhibiční účinky na KOD polymerázu
- 1.
SYSNO ASEP 0552358 Document Type L - Prototype, Functional Specimen R&D Document Type Prototype, Functional Specimen RIV Subspecies Functional Specimen Title Plazmid pro účinnou expresi rekombinatní myší IgG protilátky Bg1, která má inhibiční účinky na KOD polymerázu Title Plasmid for efficient expression of recombinant mouse IgG antibody Bg1 with KOD DNA polymerase inhibitory activity Author(s) Moravec, Tomáš (UEB-Q) RID, ORCID
Vítek, Radovan (UEB-Q)
Svobodová, Jitka (UEB-Q)
Kratochvílová, Kateřina (UEB-Q) ORCID, RID
Čeřovská, Noemi (UEB-Q) RID, ORCIDYear of issue 2021 Int.Code TP01010037_1306 Technical parameters Celková velikost plazmidu – 14835 bp, celková velikost T-DNA 8222 bp, počet kazet – 3 exprimující protein, 2 x MAR sekvence, selekční marker v E.coli a A. tumefaciens – Spektinomycin, selekční marker v rostlinách – není. Replikační počátky pMB1 a pVS1 ori Economic parameters Plazmid umožňuje produkci a akumulaci značného množství důležité monoklonální protilátky proti KOD polymeráze. Protilátky proti polymeráze KOD jsou důležitou složkou speciálních premixů pro PCR. Produkce protilátek v rostlinách je oproti produkci v buněčných kulturách ekonomicky velmi výhodná Owner Name Ústav experimentální botaniky AV ČR, v. v. i. Registration Number of the result owner 61389030 Applied result category by the cost of its creation A - Vyčerpaná část nákladů <= 5 mil. Kč License fee fee A - Poskytovatel licence požaduje licenční poplatek Internal identification code of the product assigned by its creator, Regulation no., TP01010037_1306 Language cze - Czech Country CZ - Czech Republic Keywords monoclonal antibody ; heavy chain ; light chain OECD category Biochemistry and molecular biology R&D Projects TP01010037 GA TA ČR - Technology Agency of the Czech Republic (TA ČR) Institutional support UEB-Q - RVO:61389030 Annotation Vektor sestávající z celkem pěti nezávislých kazet. Dvě z nich obsahují kodónově optimalizovaný gen pro expresi těžkého, respektive lehkého řetězce myší IgG protilátky Bg1. V tomto vektoru je protilátka Bg1 s inhibičními účinky na KOD DNA polymerázu pod kontrolou 35S promotoru a terminátoru z viru CaMV a 5 i 3 NTR oblastmi z viru CPMV. Jako signální peptid je použit H7 peptid lidské IgG. Dále vektor obsahuje kazetu zajišťující expresi supresoru genového silencingu P19 z viru TBSV. Na zbývajících dvou pozicích jsou sekvence MAR z tabáku (RB7 a TM2), které zvyšují expresi v rostlinách. Tento vektor v listech tabáku vede k silné expresi protilátky Bg1. 5 až 7 dní po infiltraci lze z listů extrahovat a například afinitní chromatografií vyizolovat myší monoklonální IgG protilátku Bg1. Description in English Vector consisting of a total of five independent cassettes. Two of them contain a codon-optimised gene for the expression of the heavy and light chain, respectively, of a mouse IgG antibody Bg1 (anti-KOD polymerase). The Bg1 antibody is under the control of the 35S promoter and terminator of CaMV and the 5 and 3 NTR regions of CPMV. The H7 peptide of human IgG is used as a signal peptide. The vector also contains a cassette expressing the P19 gene silencing suppressor from TBSV virus. The remaining two positions contain the MAR sequences from tobacco (RB7 and TM2) that increase expression in plants. This vector leads to strong expression of the mouse Bg1 antibody in tobacco leaves. 5 to 7 days after infiltration, the mouse monoclonal IgG antibody Bg1 can be extracted from the leaves and isolated e.g. by affinity chromatography. Workplace Institute of Experimental Botany Contact David Klier, knihovna@ueb.cas.cz, Tel.: 220 390 469 Year of Publishing 2022
Number of the records: 1