Production of polyclonal antibodies to a recombinant coat protein of Potato virus Y

0320735 - ÚEB 2009 RIV CZ eng J - Journal Article
Kmoníčková, Jitka - Plchová, Helena - Moravec, Tomáš - Hoffmeisterová, Hana - Dědič, P. - Čeřovská, Noemi
Production of polyclonal antibodies to a recombinant coat protein of Potato virus Y.
[Produkce polyklonálních protilátek proti rekombinantnímu proteinu Y viru bramboru.]
Folia Microbiologica. Roč. 53, č. 5 (2008), s. 438-442. ISSN 0015-5632. E-ISSN 1874-9356
R&D Projects: GA MŠMT 1M06030
Institutional research plan: CEZ:AV0Z50380511
Keywords : ESCHERICHIA-COLI * ANTISERUM * ELISA
Subject RIV: EB - Genetics ; Molecular Biology
Impact factor: 1.172, year: 2008

The gene encoding the coat protein (CP) of a potato virus Y (PVY) was cloned into expression vector pMPM-A4 Omega. PVY CP was expressed in Escherichia coli and the purified recombinant protein was used for raising rabbit polyclonal antibodies. The sera and antibodies were tested for the detection of PVY in the laboratory host Nicotiana tabacum cv. Petit Havana SR1 and in various cultivars of the natural host Solanum tuberosum by ELISA as well as by Western blots. The antibodies can be used for the detection of the whole strain spectrum of PVY by indirect plate trapped antigen ELISA and Western blot, but not by double antigen sandwich ELISA.

Gen kódující obalový protein (CP) Y viru bramboru (PVY) byl klónován v expresním vektoru pMPM-A4 Ω. Obalový protein PVY byl exprimován v Escherichia coli a purifikovaný rekombinantní protein byl použit pro produkci králičích polyklonálních protilátek. Metodou ELISA a Western blotu byla získaná antiséra a protilátky testovány na přítomnost PVY v rostlinách Nicotiana tabacum cv. Samsun a v různých kultivarech Solanum tuberosum. Získané protilátky byly specifické pro celé kmenové spektrum PVY při použití metody IPTA ELSA a Western blotu,s ale nereagovaly při užití DAS ELISA metody.
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0169520