Number of the records: 1
Extrakce a stanovení aktivity cytokinin N- a O-glukosyltransferas v rostlinných pletivech
- 1.
SYSNO ASEP 0172344 Document Type J - Journal Article R&D Document Type Journal Article Subsidiary J Ostatní články Title Extrakce a stanovení aktivity cytokinin N- a O-glukosyltransferas v rostlinných pletivech Title Extraction and determination of N- and O-glucosyltranferases activity in plant tissues Author(s) Gaudinová, Alena (UEB-Q) ORCID
Vaňková, Radomíra (UEB-Q) RID, ORCID
Dobrev, Petre (UEB-Q) RID, ORCID
Motyka, Václav (UEB-Q) RID, ORCIDSource Title Biologické Listy. - : Ústav molekulární genetiky AV ČR, v. v. i. - ISSN 0366-0486
Roč. 68, č. 3 (2003), s. 176-179Number of pages 4 s. Language cze - Czech Country CZ - Czech Republic Keywords cytokinin ; glukosyltransferase(s) ; enzyme activity Subject RIV CE - Biochemistry R&D Projects IAA6038002 GA AV ČR - Academy of Sciences of the Czech Republic (AV ČR) GA206/03/0313 GA ČR - Czech Science Foundation (CSF) ME 505 GA MŠMT - Ministry of Education, Youth and Sports (MEYS) CEZ AV0Z5038910 - UEB-Q Annotation V práci je popsán postup extrakce, čištění a stanovení enzymové aktivity cytokinin N- a O-glucosyltransferas katalyzujících v rostlinných pletivech konjugaci cytokininů na glykosidy. Metoda je založena na měření konverse radioaktivně značených substrátových cytokininů (Z pro oba enzymy, BA a DHZ pouze pro cytokinin N-glukosyltransferasu) v testech in vitro. Aktivita obou enzymů se stanovuje po inkubaci částečně purifikovaného bílkovinného preparátu se značeným substrátem v přítomnosti UDPG (donor glukózy) a vyjadřuje se v procentech radioaktivity vzniklých produktů enzymové reakce (cytokinin N- nebo O-glukosidy) po jejich oddělení od nezreagovaného substrátového cytokininu pomocí HPLC nebo v přepočtu na 1 mg bílkovin detekovaných v hrubém extraktu. Zhodnoceny jsou výhody a nevýhody uvedeného postupu. Description in English The procedure for extraction, purification and determination of enzyme activities of cytokinin N- and O-glucosyltransferases catalysing conjugation of cytokinins to corresponding glycosides in plants is described. The method is based on the conversion of radiolabelled substrate cytokinins (Z for both enzymes, BA and DHZ for cytokinin N-glucosyltransferase only) in the in vitro assays. The activities of respective enzymes are being determined after incubation of partially purified protein preparations with the labelled substrate in the presence of UDPG (donor of the glucosyl moiety) and calculated on the basis of measurement of the radioactivity associated with the product(s) of the enzyme reaction (cytokinin N- and/or O-glucosides) after its (their) separation from substrate cytokinin(s) by appropriate chromatographic method (HPLC). Advantages and disadvantages of the described procedure are evaluated. Workplace Institute of Experimental Botany Contact David Klier, knihovna@ueb.cas.cz, Tel.: 220 390 469 Year of Publishing 2004
Number of the records: 1