Rekombinantní protein – Toxin A (Clostridium difficile)

0477716 - BTÚ 2018 RIV CZ cze L - Prototype, f. module
Vaňková, Lucie - Malý, Petr
Rekombinantní protein – Toxin A (Clostridium difficile).
[Recombinant protein – Toxin A (Clostridium difficile).]
Internal code: S17BTU0152 ; 2017
Technical parameters: Dokumentace s technologickým popisem produkce, purifikace, sekvenční identifikace a charakterizace každého typu vazebného proteinu.
Economic parameters: podpora vývoje veterinární vakcíny
R&D Projects: GA TA ČR(CZ) TH01010837
Institutional support: RVO:86652036
Keywords : bacterial toxin * veterinary vaccine * ELISA * recombinant protein
OECD category: Veterinary science

Molekulárním klonováním byl sestrojen rekombinantní plasmid nesoucí cDNA sekvenci toxinu A baktérie C.difficile, kódujícího sekvenci C-terminální části proteinu (pozice 2366-2710) s přidaným N-koncovým 6xHis-tagem. Plasmid byl použit k produkci proteinu o délce 359 aminokyselin o celkové velikosti 36 kDa. Ověření proteinu bylo provedeno pomocí ELISA, SDS-PAGE a Western blotu. Protein může být použit k diagnostickému průkazu přítomnosti protilátek v séru a kolostru imunizovaných zvířat metodou ELISA.

Molecular cloning was used to construct a recombinant plasmid vector carrying cDNA of Epsilon-toxin type B (C.perfringens), coding for C-terminal amino acid sequence (2366-2710), with installed 6xHistidine tag at the N-terminus. This plasmid vector produces protein of 359 amino acid residues and the molecular weight 36 kDa. Protein identity was confirmed by SDS-PAGE, Western blot and ELISA. This recombinant protein can be used for the investigation of antibody level in serum and colostrum of immunized animals by ELISA method.
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0274092