Number of the records: 1
Optimalizovaný protokol pro transgenezi hlodavců pomocí transpozonových vektorů Sleeping Beauty
- 1.
SYSNO ASEP 0427117 Document Type Z - Pilot plant, Verified Technology, Plant Breed/Variety R&D Document Type Pilot Plant, Verified Technology, Plant Breed/Variety RIV Subspecies Poloprovoz Title Optimalizovaný protokol pro transgenezi hlodavců pomocí transpozonových vektorů Sleeping Beauty Title Optimized protocol for rodent transgenesis with the Sleeping Beauty transposon vectors Author(s) Pravenec, Michal (FGU-C) RID, ORCID
Landa, Vladimír (FGU-C) RID
Zídek, Václav (FGU-C) RID
Uhlík, L. (CZ)Year of issue 2013 Int.Code Protokol SB transgeneze Technical parameters Technické parametry výsledku jsou detailně popsané v článku Ivics, Landa, Zídek, Pravenec et al. Germline transgenesis in rodents by pronuclear microinjection of Sleeping Beauty transposons. Nature Protocols 9: 773-793, 2014 Economic parameters Dílčí výsledek, který umožní efektivní transgenezi pro produkci transgenních potkanů pro biomedicínský výzkum Owner Name Fyziologický ústav AV ČR, v .v .i. Registration Number of the result owner 67985823 Applied result category by the cost of its creation A - Vyčerpaná část nákladů <= 5 mil. Kč Possible third party use of the result P - Využití výsledku jiným subjektem je v některých případech možné bez nabytí licence Internal identification code of the product assigned by its creator, Regulation no., Protokol SB transgeneze Licence fee Z - Poskytovatel licence nepožaduje v některých případech licenční poplatek Language cze - Czech Country CZ - Czech Republic Keywords transposon transgenesis ; Sleeping Beauty ; rat Subject RIV EB - Genetics ; Molecular Biology R&D Projects TA02010013 GA TA ČR - Technology Agency of the Czech Republic (TA ČR) Institutional support FGU-C - RVO:67985823 Annotation Protokol je založený na injekci prvojader oplozených oocytů směsí syntetické mRNA, kódující SB100X hyperaktivní transpozázu společně s cirkulární plasmidovou DNA nesoucí transgenní konstrukt, který má po stranách vazebná místa pro transpozázu. Po translaci transpozázové mRNA dojde k enzymatické excizi transgenní kazety z plazmidové DNA a následné permanentní inzerci do genomu. Vysoce efektivní transgeneze pomocí tohoto protokolu trvá přibližně 3 měsíce Description in English The procedure is based on co-injection of synthetic mRNA encoding the SB100X hyperactive transposase, together with circular plasmid DNA carrying a transgene construct flanked by binding sites for the transposase, into the pronuclei of fertilized oocytes. Upon translation of the transposase mRNA, enzyme-mediated excision of the transgene cassettes from the injected plasmids followed by permanent genomic insertion. Highly effective transgenesis by using this protocol takes approximately 3 months Workplace Institute of Physiology Contact Lucie Trajhanová, lucie.trajhanova@fgu.cas.cz, Tel.: 241 062 400 Year of Publishing 2016
Number of the records: 1