A comparative study on ganglioside micelles using electronic energy transfer, fluorescence correlation spectroscopy and light scattering techniques

0333803 - ÚFCH JH 2010 RIV GB eng J - Journal Article
Šachl, Radek - Mikhalyov, I. - Hof, Martin - Johansson, L. B. A.
A comparative study on ganglioside micelles using electronic energy transfer, fluorescence correlation spectroscopy and light scattering techniques.
[Studie micel tvořených GM1 gangliosidy za použití elektronického přenosu energie, fluorescenční korelační spektroskopie a rozptylu světla.]
Physical Chemistry Chemical Physics. Roč. 11, č. 21 (2009), s. 4335-4343. ISSN 1463-9076. E-ISSN 1463-9084
R&D Projects: GA MŠMT(CZ) LC06063; GA ČR(CZ) GD203/05/H001
Institutional research plan: CEZ:AV0Z40400503
Keywords : atomic-force microscopy * Alzheimers disease * precise measurement
Subject RIV: CF - Physical ; Theoretical Chemistry
Impact factor: 4.116, year: 2009

Ganglioside (G(M1)) micelles have been studied by means of three different techniques: fluorescence correlation spectroscopy (FCS), electronic energy transfer, as monitored by time-resolved fluorescence spectroscopy, as well as static and dynamic light scattering. The aggregation numbers obtained, 168 +/- 4, remain constant over a wide range of G(M1) concentrations (0.764-156 mu M), are very consistent when using dfferent donor-acceptor energy transfer pairs and have served as reference values in tests of the FCS method. It is recommended to calibrate the focal volume by using known dye concentrations. For this the rhodamine dye, 5-TAMRA, turns out to be most suitable. It is also shown that FCS provides correct values of the aggregation numbers, provided that the focal volume is calibrated by using updated values of the diffusion constant of Rhodamine 6G. These results also support recent methodological advances in FCS.

Micely tvořené GM1 gangliosidy byly studovány pomocí tří odlišných metod: fluorescenční korelační spektroskopie (FCS), elektronického přenosu energie monitorovaného časově rozlišenou spektroskopií a statického i dynamického rozptylu světla. Obdržená agregační čísla 168 ± 4 zůstávají konstantní v širokém koncentračním rozmezí (0.764 – 156 mM). Agregační čísla byla velmi konzistentní za použití různých donor-akceptor párů a sloužila jako referenční hodnoty v testech FCS. Doporučuje se kalibrovat fokální objem pomocí známých koncentrací fluorescenční značky. Pro tento účel se ukázala býti spolehlivá 5-TAMRA. FCS poskytuje správná agregační čísla za předpokladu, že ke kalibraci jsou použity aktualizované hodnoty difusního koeficientu rhodaminu-6G.
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0178708