Plazmid pro snadnou a účinnou expresi rekombinatního proteinu Ole-ProteinGA vhodného pro afinitní purifikaci protilátek z rostlinného materiálu

0552357 - ÚEB 2022 RIV CZ cze L - Prototype, f. module
Moravec, Tomáš - Vítek, Radovan - Svobodová, Jitka - Kratochvílová, Kateřina - Čeřovská, Noemi
Plazmid pro snadnou a účinnou expresi rekombinatního proteinu Ole-ProteinGA vhodného pro afinitní purifikaci protilátek z rostlinného materiálu.
[Plasmid for the simple and efficient expression of recombinant Ole-ProteinGA protein for affinity purification of IgG antibodies from plant material.]
Internal code: TP01010037_1301 ; 2021
Technical parameters: Celková velikost plazmidu – 10723 bp, celková velikost T-DNA 4110 bp, počet kazet – 2, selekční marker v E.coli a A. tumefaciens – Spektinomycin, selekční marker v rostlinách – není. Replikační počátky pMB1 a pVS1 ori
Economic parameters: Vektor slouží k výrobě afinitního nosiče pro snadnou a rychlou purifikaci protilátek z rostlin a tak výrazně snižuje celkové produkční náklady.
R&D Projects: GA TA ČR(CZ) TP01010037
Institutional support: RVO:61389030
Keywords : expression system * plants * general cloning vector
OECD category: Biochemistry and molecular biology

Vektor obsahující kazetu expresi fúzního rekombinatního proteinu At Oleosin – Protein G/A pod kontrolou promotoru a terminátoru viru CaMV a 5 i 3 NTR oblastmi z viru CPMV. Dále vektor obsahuje druhou kazetu zajišťující expresi supresoru genového sillencingu P19 z viru ToBSV. Tento vektor v listech tabáku vede k silné expresi OleProt GA a tvorbě proteinových depozitů. Po extrakci lze z těchto depozitů s pomocí lecitinu, oleje a sonikátoru vytvořit tukové micely, na jejichž povrchu je afinitní nosič Protein G/A. Ten lze opakovaně použít k afinitní purifikaci protilátek z rostlinného materiálu.

A vector containing the recombinant fusion protein expression cassette At oleosin protein G / A under the control of the CaMV promoter and terminator and the 5 and 3 NTR regions of the CPMV virus. The vector also contains a second cassette for expression of the ToBSV P19 gene suppressor. This vector leads to strong expression of OleProt GA in tobacco leaves and the formation of protein deposits. After extraction, fat micelles can be formed from these deposits with the help of lecithin, oil and sonicator, on the surface of which an affinity carrier protein G / A is located. It can be used repeatedly for affinity purification of antibodies from plant material.
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0327502