Redox značení DNA - od jednoduché detekce DNA pomocí modifikace komplexy oxidu osmičelého k ratiometrické analýze sekvencí

0456521 - ÚOCHB 2016 RIV CZ cze C - Conference Paper (international conference)
Havran, Luděk - Balintová, Jana - Vidláková, Pavlína - Macíčková-Cahová, Hana - Pivoňková, Hana - Hocek, Michal - Fojta, Miroslav
Redox značení DNA - od jednoduché detekce DNA pomocí modifikace komplexy oxidu osmičelého k ratiometrické analýze sekvencí.
[Redox DNA Labeling - from Simple DNA Detection by Osmium Tetroxide Complexes Modification to Ratiometric Sequence Analysis.]
Sborník přednášek mezinárodní odborné konference XXXIV. Moderní Elektrochemické Metody. Ústí nad Labem: Best Servis, 2014 - (Navrátil, T.; Fojta, M.; Pecková, K.), s. 57-59. ISBN 978-80-905221-2-1.
[Moderní Elektrochemické Metody /34./. Jetřichovice (CZ), 19.05.2014-23.05.2014]
R&D Projects: GA ČR GAP206/12/2378; GA MŠMT EE2.3.30.0019
Institutional support: RVO:68081707 ; RVO:61388963
Keywords : DNA electrochemical analysis * chemically modified DNA * DNA sensors * redox labels
Subject RIV: CG - Electrochemistry

Elektrochemické metody našly široké uplatnění jak v analýze DNA a studiu jejích interakcí s různými látkami, tak i při vývoji senzorů pro detekci hybridizace DNA. DNA je přirozeně elektroaktivní molekula, která poskytuje na různých typech pracovních elektrod řadu analyticky využitelných elektrochemických signálů. Pro některé typy analýz, zvláště pak při vývoji DNA hybridizačních senzorů, se osvědčilo užití redox aktivních značek. Jedním ze způsobů jak zavést do DNA elektroaktivní značku je její modifikace pomocí komplex oxidu osmičelého s dusíkatými ligandy (Os,L). Vznikající adukty poskytují na rtuťových i uhlíkových elektrodách elektrochemické signály v důsledku redukce/oxidace atomu osmia v molekule aduktu. Tato metoda značení DNA našla uplatnění ve vysoce citlivé analýze DNA a také v analýze nukleotidových sekvencí. Další z metod pro přípravu redox značené DNA je enzymatická inkorporace značených deoxyribonukleotid trifosfátů (dNTP) pomocí DNA polymeráz. Značené dNTP lze připravit jednoduchou cross-coupling reakcí ve vodném prostředí. V tomto příspěvku bude demonstrována aplikace různých redox aktivních značek v elektrochemické analýze DNA.

DNA is electroactive molecule producing analytically useful intrinsic voltammetric signals. For some applications is a useful use redox active tag to improve specificity of the analysis. One from approaches how to prepare DNA bearing redox label is its modification by complexes of osmium tetroxide with nitrogen ligands. This method find wide used in highly sensitive DNA detection and in development of electrochemical DNA hybridization sensors. Another possibility for preparation of redox labeled DNA is incorporation of redox tags modified deoxynucleotide triphosphates by DNA polymerases. In this contribution will be demonstrated application of various redox labels in electrochemical analysis of DNA.
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0257028