Způsob získání strukturních a funkčních informací o proteinech na bázi polarizační fluorescenční mikroskopie a zařízení k provádění tohoto způsobu

0431926 - ÚVGZ 2015 RIV cze P - Patent Document
Lazar, Josef
Způsob získání strukturních a funkčních informací o proteinech na bázi polarizační fluorescenční mikroskopie a zařízení k provádění tohoto způsobu.
[Method of acquiring structural and functional information on proteins based on polarization fluorescent microscopy and apparatus for making the same.]
2010. Owner: Ústav systémové biologie a ekologie AV ČR, v. v. i.- Jihočeská univerzita v Českých Budějovicích.-. Date of the patent acceptance: 24.11.2010. Patent Number: 302233
Institutional research plan: CEZ:AV0Z60870520
Keywords : fluorescence microscopy
Subject RIV: BH - Optics, Masers, Lasers
http://isdv.upv.cz/portal/pls/portal/portlets.pts.det?xprim=1457298&lan=cs

Při způsobu získání strukturních a funkčních informací o proteinech, na bázi polarizační fluorescenční mikroskopie, se protein s navázaným fluoroforem podrobí dvoufotonové nebo vícefotonové fluorescenční mikroskopii, kdy se zkoumaný protein s fluoroforem ozáří laserovým svazkem, jehož světlo je polarizované při alespoň dvou různých polarizacích, a který excituje fluorescenci fluoroforu, a na základě informace o lokalizaci, intenzitách a polarizaci fluorescence excitované různými polarizacemi excitačního laserového svazku se zjistí lokalizace a míra anisotropie absorpce a/nebo lokalizace a míra anisotropie fluorescence, a ta se pak užije ke zjištění strukturních a funkčních a vlastností proteinů. Vhodné zařízení pro získání strukturních a funkčních informací o proteinech na bázi polarizační fluorescenční mikroskopie obsahuje modulátor (P) pro rychlou modulaci polarizace excitačního svazku (1) pro vyvolání dvoufotonové nebo vícefotonové fluorescence a řídicí jednotku (R), přičemž činnost modulátoru (P)

The invented method of acquiring structural and functional information on proteins based on polarization fluorescent microscopy is characterized in that protein with a bonded fluorophore is subjected to two-photon or multi-photon fluorescent microscopy where the investigated protein with fluorophore is irradiated by a laser beam the light of which is polarized in at least two different polarizations and a which excites fluorophore fluorescence. Based on information on localization, intensities and polarization of fluorescence excited by different polarizations of the exciting laser beam, there is determined a localization and extent of anisotropy of absorption and/or localization and extent of fluorescence anisotropy, which is then used for determining both structural and functional information on protein properties. The present invention also discloses a suitable apparatus for acquiring structural and functional information on proteins based on polarization fluorescent microscopy wherein such apparatus comprises a modulator (P) for quick polarization modulation of an exciting beam (1) to generate a two-photon or multi-photon fluorescence and a control unit (R), wherein the operation of both the modulator (P) and the control unit (R) is synchronized by microscope (M) scanning such that information on fluorescence intensity recorded by the microscope (M) is assignable to various polarization states of the exciting beam (1) based on knowledge of a time profile of the used modulation of the exciting beam (1) polarization induced by the modulator (P).
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0236447