Příprava rekombinantních proteinů HIC1 a AXIN2

0372080 - ÚMG 2012 RIV CZ cze L - Prototype, f. module
Kořínek, Vladimír
Příprava rekombinantních proteinů HIC1 a AXIN2.
[Preparation of recombinant proteins HIC1 a AXIN2.]
Internal code: HIC1, AXIN2 ; 2009
Technical parameters: rekombinantní proteiny HIC1 a AXIN2
Economic parameters: výsledek připraven ke komerčnímu využití
R&D Projects: GA MŠMT 1M0506
Institutional research plan: CEZ:AV0Z50520514
Keywords : recombinant protein * HIC1 * AXIN2
Subject RIV: EB - Genetics ; Molecular Biology

Jedním z genů, jejichž exprese je inhibována proteinem HIC1, je gen kódující protein AXIN2, který funguje jako negativní regulátor signální kaskády Wnt. Vysoká produkce proteinu AXIN2 tak snižuje expresi cílových genů tzv. kanonické signalizace Wnt. Regulace genu AXIN2 by tak mohla být další možností, jak HIC1 ovlivňuje fungování kaskády Wnt. cDNA kódující protein AXIN2 byla použita pro produkci rekombinantního polypeptidu vhodného (neobsahuje sekvence homologní příbuznému proteinu AXIN1) pro imunizaci králíků a laboratorních myší. Protože v současné době není na trhu monoklonální protilátka proti proteinu HIC1 vhodná pro imunohistochemická barvení, v produkčním kmeni bakterií E.coli byl připraven rekombinantní fragment lidského HIC1 (aminokyseliny 155-396). Oba proteiny (AXIN2, HIC1) získané z bakteriálních kultur afinitní chromatografií byly předány partnerům z firmy Exbio Praha, která dále zajistí přípravu myších monoklonálních protilátek.

One of genes the expression of which is inhibited by the HIC1 protein is the gene encoding protein AXIN2, which acts as a negative regulator of the Wnt signaling cascade. High level of AXIN2 leads to decreased expression of target genec of the canonical Wnt signaling pathway. Regulation of AXIN2 could therefore represent another possibility of how HIC1 affects the functioning of the Wnt cascade. cDNA encoding AXIN2 (devoid of sequences homologous to a similar protein AXIN1) was used to produce recombinant polypeptide suitable for immunization of mice and rabbits. Because at present no monoclonal antibody to the protein HIC1 is available suitable for immunohistochemical staining, we prepared recombinant fragment of human HIC1 (aa 155-396). Both proteins (AXIN2 and HIC1) were provided to the commercial partners (EXBIO Praha) for further preparation of mouse mAbs. Tle prepared proteins are suitable for preparation of unique antibody reagents.
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0205473