Příprava monoklonálních protilátek proti proteinu LARGE

0355226 - ÚMG 2011 RIV CZ cze L - Prototype, f. module
Hořejší, Václav
Příprava monoklonálních protilátek proti proteinu LARGE.
[Preparation of monoclonal antibodies to protein LARGE.]
Internal code: LARGE-01, LARGE-02 ; 2010
Technical parameters: Myší hybridomové buněčné linie produkující monoklonální protilátky rozpoznávající protein LARGE, výsledek ověřen pro zavedení do výroby
Economic parameters: výsledek připraven ke komerčnímu využití na základě smlouvy o předání výsledku realizátorovi
R&D Projects: GA MŠMT 2B06064
Institutional research plan: CEZ:AV0Z50520514
Keywords : LARGE * congenital muscular dystrophy * hybridoma
Subject RIV: EB - Genetics ; Molecular Biology

Mutace v genu kódujícím protein LARGE jsou jednou z příčin kongenitální svalové dystrofie. Kromě toho jsme pozorovali zvýšenou expresi příslušného genu u leukemických buněk ve srovnání s B-prekurzory a naopak sníženou expresi u MLL. Připravili jsme sérii monoklonálních protilátek proti tomuto antigenu. Většina z nich je dobře použitelná pro průtokovou cytometrii i imunoblotting. Nejlepší z nich (LARGE-01 a LARGE-02) jsou nyní testovány na pacientských vzorcích. Budou též firmou Apronex nabízeny prostřednictvím partnerských distribučních firem. Kvalitní komerčně dostupné protilátky proti proteinu LARGE nebyly dosud k dispozici. Představují tedy nové unikátní reagencie okamžitě použitelné v základním i aplikovaném výzkumu. Připravené protilátky slouží k detekci proteinu LARGE pomocí imunoblotingu a průtokové cytometrie. Jsou tak základním nástrojem studia exprese a funkce proteinu LARGE v lidských buňkách a mohou stát i nástrojem i pro rutinní diferenciální diagnostiku leukemií.

Mutations in the gene encoding the protein LARGE cause a disease congenital muscular dystrophy. Moreover we observed increased expression of this gene in leukaemic cells and decreased expression in MLL. We prepared a series of hybridomas producing mAbs to this protein. Most of them are useful in flow cytometry and Western blotting. The best of them (LARGE-01 a LARGE-02) are now under testing on patient samples and are commercialized by Apronex s.r.o. Good mAbs to protein LARGE have not yet been commercially available. Our mAbs therefore represent unique reagents immediately usable in basic and applied research. The mAbs are useful for detection of the protein CLIC5a by means of immunoblotting and cytofluorometry and represent basic tools for research on expression and function of the protein in human cells and may become diagnostic tools for routine differential diagnostics of leukaemia.
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0194045