Příprava a charakterizace polyklonálních protilátek rozpoznávajících N-koncovou oblast nádorového supresoru HIC1

0355021 - ÚMG 2011 RIV CZ cze L - Prototype, f. module
Kořínek, Vladimír
Příprava a charakterizace polyklonálních protilátek rozpoznávajících N-koncovou oblast nádorového supresoru HIC1.
[Preparation and characterization of polyclonal antibodies recognizing N-terminal part of tumor suppressor HIC1.]
Internal code: HIC1 ; 2010
Technical parameters: Polyklonální protilátky rozpoznávající N-koncovou oblast nádorového supresoru HIC1, výsledek ověřen pro zavedení do výroby
Economic parameters: výsledek připraven ke komerčnímu využití na základě smlouvy o předání výsledku realizátorovi
R&D Projects: GA MŠMT 1M0506
Institutional research plan: CEZ:AV0Z50520514
Keywords : HIC1 * polyclonal antibody
Subject RIV: EB - Genetics ; Molecular Biology

Pomocí standardních molekulárně biologických metod byla analyzována exprese různých forem proteinu HIC1 v lidských primárních a nádorových buňkách. Zjistili jsme, že tzv. dlouhá forma lidské bílkoviny je prodloužená na N-konci molekuly o 20 aminokyselin. Pro přípravu protilátek byla vybrána střední část proteinu HIC1. Ta byla vyprodukována v bakteriích E.coli BL-21 (DE3), afinitně vyčištěna a použita pro imunizaci pokusných králíků. Vzniklá antiséra detekují endogenní protein HIC1 v lidských buňkách a jsou cenným a unikátním nástrojem pro detekci proteinu HIC1 vhodným zejména pro imunoprecipitaci a imunocytochemická barvení.

Standard molecular biological methods were used to analyze expression of various forms of protein HIC1 in human primary and tumor cells. We found that the so called long firm of the human protein is extended at the N-terminus by 20 amino acids. Central part of HIC1 was chosen for preparation of antibodies. This part was prodced as a recombinant protein in E.coli BL-21 (DE3) bacteria, affinity purified and used for immunization of rabbits. The antisera obtained in this way represent a valuable and unique tool for the detection of human protein HIC1, especially using the techniques of immunoprecipitation and immunocytochemical staining.
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0193879