Genetically modified S. cerevisiae strain lacking both importers and exporters of potassium and sodium cations

0337845 - FGÚ 2010 RIV CZ eng L - Prototype, f. module
Petrezsélyová, Silvia - Herynková, Pavla - Sychrová, Hana
Genetically modified S. cerevisiae strain lacking both importers and exporters of potassium and sodium cations.
[Genově modifikované kmeny S. cerevisiae postrádající v plasmatické membráně exportní i importní systémy pro sodné a draselné kationy.]
Internal code: S. cerevisiae BYT1245 a BYT12345 ; 2009
Technical parameters: Mutantní kmeny S. cerevisiae BYT1245 (nha1 ena1-5 trk1 trk2) a BYT12345 (nha1 ena1-5 tok1 trk1 trk2) s vysokou citlivostí k solím alkalických kationů a zároveň s neschopností růst na médiích s limitně nízkým obsahem draselných solí
Economic parameters: náklady v 300 000,- Kč, licenční poplatek 50 000,- Kč
R&D Projects: GA MŠMT(CZ) LC531; GA ČR GA204/08/0354; GA AV ČR(CZ) IAA500110801
Institutional research plan: CEZ:AV0Z50110509
Keywords : yeast heterologous expression * S. cerevisiae * salt-sensitive mutant
Subject RIV: EE - Microbiology, Virology

S. cerevisiae mutant strains lacking the genes encoding alkali-metal-cation exporters (NHA1, ENA1, ENA2, ENA5, TOK1) and potassium importers (TRK1, TRK2) have been constructed. The TRK1 gene has been substituted by the LEU2 gene; the three ENA genes, TOK1 and TRK2 genes have been replaced by the kanMX cassette. Finally, the LEU2 and kanMX cassettes from all strains were replaced by cre-loxP system leaving a single loxP site. Unique GMO strains in the BY4741 background lacking either 6 or 7 transporters have been created to study heterologously expressed sodium and potassium transporters from both lower and higher eukaryots

Byly vytvořeny mutantní kmeny S. cerevisiae postrádající geny kódující exportní systémy pro kationy alkalických kovů (NHA1, ENA1, ENA2, ENA5 a TOK1) a geny pro importní systémy draselných kationů (TRK1, TRK2). TRK1 gen byl nahrazen genem LEU2 a tři geny ENA spolu s TOK1 a TRK2 byly vyměněny za kanMX kazetu. Na závěr byly kanMX kazety odstraněny pomoci cre-loxP systému za vzniku jedinečného loxP místa. Vznikly tak dva unikátní GMO kmeny postrádající šest nebo sedm transportérů v genetickém pozadí BY4741 s využitím pro studium heterologně exprimovaných transportérů sodných a draselných kationů z nižších i vyšších eukaryot
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0181749