Micro-extraction of hydrolyzed free and conjugated sterols for their determination using HPLC

0337703 - ÚEB 2010 US eng J - Journal Article
Pavlík, Milan - Siglerová, Věra - Wimmer, Zdeněk - Sovová, Helena - Sajfrtová, Marie - Pavlíková, D.
Micro-extraction of hydrolyzed free and conjugated sterols for their determination using HPLC.
[Mikroextrakce hydrolyzovaných volných a konjugovaných sterolů pro jejich stanovení pomocí HPLC.]
FEBS Journal. Roč. 276, Suppl. 1 (2009), s. 288-299. ISSN 1742-464X. E-ISSN 1742-4658.
[Congress of the Federation-of-European-Biochemical-Societies /34./. Prague, 04.07.2009-09.07.2009]
R&D Projects: GA ČR(CZ) GA104/07/0977; GA MŠMT 2B06024
Institutional research plan: CEZ:AV0Z50380511; CEZ:AV0Z40720504
Keywords : phytosterols * alkaline hydrolysis * HPLC
Subject RIV: CI - Industrial Chemistry, Chemical Engineering
Impact factor: 3.042, year: 2009

The change of phytosterols concentration in plants is possible to evaluate plant metabolism. Phytosterols are used by numbers of producers with the growing interest. In the tested procedures for determination of free and conjugated sterols a quantity of an only 1 mg of isolated sample was needed for the HPLC analysis. The sample can be prepared using either the alkaline hydrolysis of steryl esters or the acid hydrolysis of steryl glycosides, which both result in obtaining free sterols. The procedure designed with no need of neutralization of the hydrolysate is an important advantage. The designed procedure has been based on employing the only alkaline hydrolysis for transformation of esters to free sterols (and sitoindosides to steryl glycosides). Steryl glycosides and free sterols can be directly analyzed using HPLC at a wavelength 210 nm. Reduced number of analyses in contrast to the original procedure is needed.

Změna koncentrace fytosterolů v rostlinách je vhodná k hodnocení rostlinného metabolismu. Výnosy množství fytosterolů jsou sledovány s rostoucím zájmem. V testovaných postupech je potřeba k určení volných a konjugovaných sterolů pro HPLC analýzu pouze množství 1 mg vzorku. Vzorky mohou být přípravovány s využitím alkalické hydrolýzy steryl esterů nebo kyselé hydrolýzy steryl glykosidů, které vedou k získání volných sterolů. V tomto postupu je významným přínosem, že není třeba neutralizovat hydrolyzát. Preferovaný postup je založen na využití pouze alkalické hydrolýzy pro transformaci esterů na volné steroly a sitoindosidů na steryl glykosidy. Steryl glykosidy a volné steroly mohou být přímo analyzovány HPLC při vlnové délce 210 nm. Oproti dosavadním postupům je redukován analytický postup.
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0181639