The time-course of agonist-induced solubilization of trimeric Gqα/G11α proteins resolved by two-dimensional electrophoresis

0320703 - FGÚ 2009 RIV CZ eng J - Journal Article
Durchánková, Dana - Novotný st., Jiří - Svoboda, Petr
The time-course of agonist-induced solubilization of trimeric Gqα/G11α proteins resolved by two-dimensional electrophoresis.
[Časový průběh solubilizace trimerních Gqα/G11α proteinů indukované agonistou.]
Physiological Research. Roč. 57, č. 2 (2008), s. 195-203. ISSN 0862-8408. E-ISSN 1802-9973
R&D Projects: GA MŠMT(CZ) LC554; GA MŠMT(CZ) LC06063; GA ČR(CZ) GA309/06/0121
Institutional research plan: CEZ:AV0Z50110509
Keywords : G proteins * solubilization * two-dimensional electrophoresis
Subject RIV: CE - Biochemistry
Impact factor: 1.653, year: 2008

In this study, we have used 2D electrophoresis for more defined resolution of Galpha subunits of G(q)alpha/G(11)alpha family from particulate membrane fraction and soluble (cytosol) cell fraction isolated as 250,000 x g supernatant and followed the time course of solubilization effect. Prolonged agonist stimulation results in specific transfer of activated Galpha subunits of G(q)alpha/G(11)alpha family from membrane fraction to cytosol. Solubilization of this class of Galpha proteins was observed after prolonged agonist stimulation only, induced by ultra high concentration of hormone and in cells expressing a large number of GPCRs, therefore rather indicate tight/persisting binding of G(q)alpha/G(11)alpha proteins to the membrane

V této studii jsme použili 2D elektroforézu pro lepší rozlišení Galfa podjednotek třídy G(q)alfa/G(11)alfa z membránové a cytosolární buněčné frakce izolované jako supernatant při 250000 x g a sledovali jsme časový průběh sloubilizace těchto proteinů. Dlouhodobá stimulace agonistou vedla k přesunu aktivovaných G(q)alfa/G(11)alfa proteinů z membránové frakce do cytosolu. Solubilizace této třídy Galfa proteinů byla pozorována pouze po dlouhodobé stimulaci agonistou ve vysoké koncentraci a v bňkách exprimujících vysoké hladiny GPCR, což ukazuje na pevnou vazbu G(q)alfa/G(11)alfa proteinů k membráně
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0169497