Comparative study of mouse and human feeder cells for human embryonic stem cells

0318479 - ÚEM 2009 RIV ES eng J - Journal Article
Eiselleová, L. - Peterková, I. - Neradil, J. - Slaninová, I. - Hampl, Aleš - Dvořák, Petr
Comparative study of mouse and human feeder cells for human embryonic stem cells.
[Srovnávací studie myších a lidských buněk podpůrných pro lidské embryonální kmenové buňky.]
International Journal of Developmental Biology. Roč. 52, č. 4 (2008), s. 353-363. ISSN 0214-6282. E-ISSN 1696-3547
R&D Projects: GA MŠMT 1M0538; GA ČR GA305/05/0434
Grant - others:GA MŠk(CZ) LC06077
Program: LC
Institutional research plan: CEZ:AV0Z50390512; CEZ:AV0Z50390703
Keywords : Human embryonic stem cell * Growth factor production * Undifferentiated growth
Subject RIV: EB - Genetics ; Molecular Biology
Impact factor: 2.359, year: 2008

Various types of feeder cells have been adopted for culture of human embryonic stem cells (hESCs) to improve their attachment and provide them with stemness-supporting factors. Here, we compared the expression and secretion of four well-established regulators of hESC pluripotency and/or differentiation among five lines of human foreskin fibroblasts and primary mouse embryonic fibroblasts throughout a standard hESC culture procedure. We found that human and mouse feeder cells secreted comparable levels of TGFBeta1. Production of TGFBeta1, activin A, and FGF-2 varied considerably among the human-derived feeder cell lines. Low- and high-producing human feeder cells as well as mouse feeder cells were evaluated for their ability to support undifferentiated growth of hESCs. We found that a significantly lower proportion of hESCs maintained on human feeder cell types expressed SSEA3, an undifferentiated cell marker.

Lidské embryonální kmenové buňky jsou standardně kultivovány na vrstvě podpůrných buněk, myších embryonálních fibroblastech. Možnost nahradit tyto druhově heterologní buňky buňkami lidskými je podmíněna mimo jiné také pochopením jejich funkce z pohledu jimi produkovaných faktorů. V této studii jsem kvantifikovali produkci vybraných růstových faktorů myšími embryonálními fibroblasty a lidskými prepuciálními fibroblasty. Zjistili jsme, že lidské a myší podpůrné buňky produkují srovnatelné hladiny TGFbeta1. Produkce růstových faktorů TGFbeta1, activinu A a FGF-2 se u lidských fibroblastů výrazně lišila. Vybrali jsme takové podpůrné buňky, které produkovaly nejvíc a nejmíň růstových faktorů a hodnotili jsme jejich schopnost podporovat nediferencovaný růst lidských ES buněk. Zjistili jsme, že signifikantně menší část lidských ES buněk kultivovaná na lidských podpůrných buňkách exprimovala SSEA3 - jeden z nejvýznamnějších markrů nediferencovaných buněk.
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0167885