0311249 - MBÚ 2009 RIV NL eng J - Journal Article
Martínková, Ludmila - Vejvoda, Vojtěch - Křen, Vladimír
Selection and screening for enzymes of nitrile metabolism.
[Výběr a hledání enzymů nitrilového metabolismu.]
Journal of Biotechnology. Roč. 133, č. 3 (2008), s. 318-326. ISSN 0168-1656. E-ISSN 1873-4863
R&D Projects: GA AV ČR IAA500200708; GA ČR GA203/05/2267; GA MŠMT(CZ) LC06010; GA MŠMT OC 171
Institutional research plan: CEZ:AV0Z50200510
Keywords : nitrilase * nitrile hydratase * amidase
Subject RIV: CE - Biochemistry
Impact factor: 2.748, year: 2008

This work critically reviews the assays of nitrile-converting and nitrile-forming enzymes (nitrilases, nitrile hydratases, amidases, aldoxime dehydratases). Most of the strains producing such enzymes were obtained by selection on media with nitriles, amides or aldoximes as nitrogen sources. Activity and enantioselectivity of the enzymes was usually assayed by time-consuming chromatographic analysis of substrates and the corresponding reaction products. Attempts at introducing faster assays resulted in several spectrophotometric methods for reaction product (ammonia, hydroxamate, methacrylamide, benzamide etc.) determination. Recently, new methods for colorimetric and fluorimetric determination of ammonia have been developed, which appear promising for high-throughput assays. Alternatively, methods consisting in determination of NADH consumed in a coupled amination reaction or pH-responsive methods are promising for this purpose

Tato práce shrnuje metody stanovení enzymů nitrilového metabolismu. Většina kmenů byla získána z kultivace na mediích, která obsahovala jako jediný zdroj dusíku nitril nebo aldoxim. Aktivita a enantioselektivita se obyčejně stanovuje pomocí časově náročných chromatografických metod. Hledání rychlejších metod vede k hledání rychlejších spektrofotometrických metod. Nedávno byly vyvinuty rychlé kolorimetrické a fluorimetrické metody, které slibují do budoucna velkou kapacitu. Jako další možnost se rýsují metody založené na stanovení NADH
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0162916