The use of physical and virtual infrastructures for the validation of algal cryopreservation methods in international culture collections

0092230 - BC 2008 RIV GB eng J - Journal Article
Day, J. G. - Lorenz, M. - Wilding, T.A. - Friedl, T. - Harding, K. - Pröschold, T. - Brennan, D. - Müller, J. - Santos, L. M. A. - Santos, M. F. - Osório, H.C. - Amaral, R. - Lukešová, Alena - Hrouzek, Pavel - Lukeš, Martin - Elster, Josef - Lukavský, Jaromír - Probert, I. - Ryan, M.J. - Benson, E. E.
The use of physical and virtual infrastructures for the validation of algal cryopreservation methods in international culture collections.
[Využití fyzické a virtuální infrastruktury při validaci metod kryoprezervace řas v mezinárodních sbírkách.]
Cryo-letters. Roč. 28, č. 5 (2007), s. 359-376. ISSN 0143-2044. E-ISSN 1742-0644
Grant - others:Evropská unie(XE) QLRT-2000-01645 (Cobra)
Institutional research plan: CEZ:AV0Z60660521; CEZ:AV0Z60050516
Source of funding: V - Other public resources
Keywords : cryopreservation * storage * culture collections
Subject RIV: EH - Ecology, Behaviour
Impact factor: 1.141, year: 2007

Two cryopreservation methods, colligative cryoprotection coupled with controlled cooling and vitrification-based, encapsulation-dehydration were validated by five members of the EU Research Infrastructure consortium, COBRA and two independent external validators. The test strain Chlorella vulgaris SAG 211-11b was successfully cryopreserved using two-step cooling employing passive (Mr Frosty) and Controlled Rate Freezers (CRF) attaining the desired recovery target within 15% of the median viability level (94%). Significant differences (P<0.05) between cooling regimes were observed where Mr Frosty was more variable (Inter-Quartile Range being 21.5%, versus 13.0% for CRF samples). Viability assessment using fluorescein diacetate gave significantly (P<0.0001) higher survival than growth in agar with median values being 96% and 89%, respectively.

Dvě kryoprezervační metody, klasická s řízeným zmrazováním a enkapsulační-dehydratační založená na vitrifikaci, byly validovány pěti členy EU výzkumného konsorcia COBRA a dvěma nezávislými externími laboratořemi. Jako testovací organismus byl použit kmen Chlorella vulgaris SAG 211-11b. Dvoustupňové zmrazování pomocí pasivního ochlazování (Mr Frosty) vykazovalo větší variabilitu nežli pomocí přístrojově řízeného zmrazování. Testy viability pomocí fluorescein diacetátu vykazovaly vyšší procento přežívání nežli růst kolonií na agaru. Největší variabilita mezi validátory se ukázala při aplikaci enkapsulace-dehydratace.
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0152609