A new tool for transcription regulation in Streptococcus pneumoniae

0040418 - MBÚ 2007 RIV SIGLE US eng C - Conference Paper (international conference)
Nováková, Linda - Přenosilová, Lenka - Sušická, Zuzana - Janeček, Jiří - Novotná, Jana - Ulrych, Aleš - Branny, Pavel
A new tool for transcription regulation in Streptococcus pneumoniae.
[Nový nástroj pro regulaci transkripce u Streptococcus pneumoniae.]
ASM Conferences Streptococcal Genetics. Washington: American Society for Microbiology, 2006, s. 72-73. ISBN 1-55581-400-X.
[ASM Conferences Streptococcal Genetics. Saint Malo (FR), 18.06.2006-21.06.2006]
Institutional research plan: CEZ:AV0Z50200510
Keywords : streptococcus pneumoniae * rnap
Subject RIV: EE - Microbiology, Virology

StkP is a single eukaryotic-type serine/threonine protein kinase in pathogenic bacterium Streptococcus pneumoniae. In vivo labeling with [33P]-orthophosphate and subsequent 2D electrophoresis revealed alpha-subunit of RNA polymerase as its potential substrates. We cloned rpoA gene coding for alpha-subunit of RNAP S. pneumoniae. His-tagged fusion protein was expressed in E. coli and purified to homogeneity. In vitro phosphorylation assay showed that RpoA is indeed a substrate for StkP. It is plausible to speculate that phosphorylation of RNAP alpha-subunit may affect either its DNA or protein binding potential and thereby alter the transcription efficiency. This is the first report of such a covalent modification of alpha-subunit of RNAP in bacteria

StkP je jediná serin/threoninová proteinkinasa kódovaná na chromozomu patogenní bakterie Streptococcus pneumoniae. Prostřednictvím in vivo značení [33P]-orthofosfátem a následné 2D elektroforézy se nám podařilo identifikovat alfa podjednotku RNA polymerasy jako potenciální substrát StkP. Gen rpoA kódující alfa podjednotku RNAP jsme klonovali a exprimovali v E. coli. Rekombinantní protein jsme purifikovali pomocí histidinové kotvy a prokázali jsme že je substrátem StkP rovněž in vitro. Fosforylace alfa podjednotky RNAP nebyla doposud v prokaryotní říši popsána. Tato modifikace může významně ovlivnit DNA vazebnou aktivitu RNAP nebo schopnost interagovat s různými transkripčními faktory a tím ovlivnit účinnost transkripce
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0134142