pOp6/LhGR: a stringently regulated and highly responsive dexamethasone-inducible gene expression system for tobacco

0023938 - BFÚ 2006 RIV GB eng J - Journal Article
Šámalová, Markéta - Brzobohatý, Břetislav - Moore, Ian
pOp6/LhGR: a stringently regulated and highly responsive dexamethasone-inducible gene expression system for tobacco.
[pOp6/LhGR: přísně regulovaný a vysoce responzivní, dexametazonem indukovatelný systém exprese transgenů pro tabák.]
Plant Journal. Roč. 41, - (2005), s. 919-935. ISSN 0960-7412. E-ISSN 1365-313X
R&D Projects: GA AV ČR(CZ) IAA5004001; GA AV ČR(CZ) KSK5052113
Institutional research plan: CEZ:AV0Z50040507
Keywords : chemically inducible gene expression * cytokinin-biosynthetic gene ipt * tobacco
Subject RIV: BO - Biophysics
Impact factor: 6.969, year: 2005

pOp/LhGR, a dexamethasone-inducible derivative of the pOp/LhG4 transcription activation system, and its use in tobacco to regulate expression of uidA (encoding beta-glucuronidase; GUS) and the cytokinin-biosynthetic gene ipt is described. The pOp/LhGR system exhibited stringent regulation and strong induced phenotypes in soil and tissue culture. A single dose of dexamethasone was sufficient to direct cytotoxic levels of ipt expression in soil grown plants although uninduced plants grew normally throughout a complete life cycle. In vitro, induced transcripts were detectable within an hour of dexamethasone application and 1nM dexamethasone was sufficient for half maximal induction of GUS activity. Various methods of dexamethasone application were successfully applied under tissue culture and greenhouse conditions. No inhibitory effects of dexamethasone or LhGR on plant development even with the highest concentrations of inducer were observed.

Je popsán systém pOp/LhGR, dexametazonem indukovatelný derivát systému aktivace transkripce pOp/LhG4, a jeho využití k dosažení regulovatelné exprese genu uidA (kódujícího beta-glukuronidázu GUS) a genu biosyntézy cytokininů ipt. pOp/LhGR vykazuje přísnou regulaci a silné indukované fenotypy při použití u rostlin kultivovaných v substrátu i pletivové kultuře. Jediná dávka dexametazonu byla dostačující pro vyvolání cytotoxických hladin exprese ipt u rostlin kultivovaných v substrátu a přitom neindukované rostliny rostly normálně v průběhu celého životního cyklu. V podmínkách in vitro byly indukované transkripty detekovatelné hodinu po aplikaci dexametazonu. Dexametazon o koncentraci 1nM byl dostačující pro dosažení poloviny maximálně dosažitelné indukce aktivity GUS. Byly úspěšně použity různé metody aplikace dexametazonu v podmínkách pletivových kultur i skleníku. Ani při nejvyšších koncentracích induktoru nebyly pozorovány žádné inhibiční účinky dexametazonu a LhGR na vývoj rostlin.
Permanent Link: http://hdl.handle.net/11104/0114562