HPLC-fluorescence detection method for determination of key intermediates of the lincomycin biosynthesis in fermentation broth

0327357 - MBÚ 2010 RIV DE eng J - Článek v odborném periodiku
Kameník, Zdeněk - Kopecký, J. - Marečková, M. - Ulanová, Dana - Novotná, Jitka - Pospíšil, Stanislav - Olšovská, Jana
HPLC-fluorescence detection method for determination of key intermediates of the lincomycin biosynthesis in fermentation broth.
[Stanovení klíčových prekurzorů linkomycinu v kultivačním médiu pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie s fluorescenční detekcí.]
Analytical and Bioanalytical Chemistry. Roč. 393, 6-7 (2009), s. 1779-1787. ISSN 1618-2642. E-ISSN 1618-2650
Grant CEP: GA ČR GA204/05/0616; GA AV ČR IAA6020410; GA MŠMT 2B08064
Výzkumný záměr: CEZ:AV0Z50200510
Klíčová slova: Lincomycin precursors * o-Phthaldialdehyde * Fluorescence detection
Kód oboru RIV: CB - Analytická chemie, separace
Impakt faktor: 3.480, rok: 2009

The biosynthetic pathway of the clinically important antibiotic lincomycin is not known in details. The precise knowledge of the lincomycin biosynthesis is a prerequisite for generation of improved derivatives by means of combinatorial genetics. Methods allowing determination of the key intermediates are very important tools of the pathway investigation. Two new high-performance liquid chromatography methods with fluorescence detection for determination of lincomycin precursors in fermentation broth of Streptomyces lincolnensis and its lincomycin nonproducing mutants were developed. The first one enables simultaneous analysis of methylthiolincosamide (MTL) and N-demethyllincomycin (NDL), whereas the second one is suitable for 4-propyl-L-proline (PPL) assay. Both methods are based on the pre-column derivatization: MTL and NDL with 4-chloro-7-nitrobenzofurazan; PPL with o-phthaldialdehyde

Biosyntetická dráha klinicky důležitého antibiotika linkomycinu nebyla dosud plně objasněna. Její přesná znalost je nezbytná pro přípravu účinnějších derivátů pomocí kombinatoriální genetiky. Metody umožňující stanovení klíčových prekurzorů v biosyntéze linkomycinu jsou velmi důležitým nástrojem pro její studium. Proto byly vyvinuty dvě nové metody vysokoúčinné kapalinové chromatografie s fluorescenční detekcí pro stanovení prekurzorů linkomycinu v kultivačním médiu Streptomyces lincolnensis a jejích mutantech, které neprodukují linkomycin. První metoda umožňuje současnou analýzu methylthiolinkosamidu (MTL) a N-demethyllinkomycinu (NDL), druhá je pak vhodná pro stanovení 4-propyl-L-prolinu (PPL). Obě metody jsou založené na předkolonové derivatizaci: MTL a NDL pomocí 4-chlor-7-nitrobenzofurazanu a PPL pomocí o-ftaldialdehydu
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0174191