0306926 - ÚMG 2009 RIV NL eng J - Článek v odborném periodiku
Bartoňová, Vanda - Král, Vlastimil - Sieglová, Irena - Brynda, Jiří - Fábry, Milan - Hořejší, Magdalena - Kožíšek, Milan - Grantz Šašková, Klára - Konvalinka, Jan - Sedláček, Juraj - Řezáčová, Pavlína
Potent inhibition of drug-resistant HIV protease variants by monoclonal antibodies.
[Účinná inhibice k léčivům rezistentních mutantů HIV proteas.]
Antiviral Research. Roč. 78, č. 3 (2008), s. 275-277. ISSN 0166-3542. E-ISSN 1872-9096
Grant CEP: GA MZd NR8571
Výzkumný záměr: CEZ:AV0Z50520514; CEZ:AV0Z40550506
Klíčová slova: HIV protease * drug resistance * Inhibiting antibody
Kód oboru RIV: EB - Genetika a molekulární biologie
Impakt faktor: 3.613, rok: 2008 ; AIS: 0.935, rok: 2008

The monoclonal antibodies 1696 and F11.2.32 strongly inhibit the activity of wild-type HIV-1 protease (PR) by binding to epitopes at the enzyme N-terminus (residues 1-6) and flap residues 36-46, respectively. Here we demonstrate that these antibodies are also potent inhibitors of PR variants resistant to active-site inhibitors used as anti-AIDS drugs. Our in vitro experiments revealed that the inhibitory potency of single-chain fragments (scFv) of these antibodies is not significantly affected by the presence of mutations in PR; inhibition constants for drug-resistant protease variants are 5-11 nM and 13-169 nM for scFv1696 and for scFvF11.2.32, respectively. Tethered dimer of HIV-1 PR variant proved to be a model protease variant resistant to dissociative inhibition by 1696, and, strikingly, it also displayed resistance to inhibition by F11.2.32, suggesting that dimer dissociation also plays a role in the inhibitory action of F11.2.32.

Monoklonální protilátky 1696 a F11.2.32 silně inhibují aktivitu přirozené HIV-1 proteasy (PR) vazbou na N-konec enzymu (aminokyseliny 1-6), resp. na oblast chlopní (aminokyseliny 36-46). Tyto protilátky jsou také dobrými inhibitory HIV-proteas rezistentních k inhibitorům aktivního místa, které se používají při léčbě AIDS. In vitro experimenty ukazují, že inhibiční potenciál rekombinantních single-chain fragmentů (scFv) odvozených od těchto protilátek není výrazně ovlivněn přítomností mutací v PR; inhibiční konstanty pro PR rezistentní k léčivům jsou 5-11 nM pro scFv1696 a 13-169 nM pro scFvF11.2.32. Kovalentně spojený dimer HIV-1 PR se ukázal jako vhodný model PR odolný k inhibici disociací nejen fragmentem 1696, ale překvapivě také F11.2.32. Tento fakt naznačuje, že disociace dimeru PR hraje roli i v inhibičním účinku F11.2.32.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0159821