Počet záznamů: 1  

Insights into catalytic action mechanism of Pseudomonas mendocina 3121-1 lipase

  1. 1.
    0102710 - UEK-B 20043003 RIV NL eng J - Článek v odborném periodiku
    Bendikiene, V. - Surinenaite, B. - Juodka, B. - Šafaříková, Miroslava
    Insights into catalytic action mechanism of Pseudomonas mendocina 3121-1 lipase.
    [Pohled na mechanismus katalýzy lipasy z Pseudomonas mendocina 3121-1.]
    Enzyme and Microbial Technology. Roč. 34, - (2004), s. 572-577. ISSN 0141-0229. E-ISSN 1879-0909
    Grant CEP: GA AV ČR KSK4055109
    Výzkumný záměr: CEZ:AV0Z6087904
    Klíčová slova: Pseudomonas mendocina * lipase
    Kód oboru RIV: CE - Biochemie
    Impakt faktor: 1.759, rok: 2004

    The hydrolysis of p-nitrophenyl butyrate catalyzed by Pseudomonas mendocina 3121-1 lipase was strongly affected by guanidine hydrochloride indicating the importance of Arg residue. Since loss of the activity in the presence of urea was negligible, the inactivation could not be attributed to protein denaturation. The enzyme was unaffected by p-chlormercuribenzoic acid (p-CMB), 2-mercaptoethanol and N-ethylmaleimide (NEM) at pH 7.0 indicating that Cys residue was essential neither to catalytic action nor to structural features of the lipase. The inactivation by K3Fe(CN)6 implied that another oxidizable amino acid residue could be important. The inactivation by N-ethylmaleimide at pH 9.0 indicated the involvement of His in the catalysis. Phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF) strongly inhibited the enzyme pointing out the essential role of Ser residue

    Hydrolýza p-nitrofenyl butyrátu katalyzovaná lipasou z Pseudomonas mendocina 3121-1 byla silně ovlivněna guanidin hydrochloridem, ukazujícím podstatný význam argininového zbytku. Protože ztráta aktivity v přítomnosti močoviny byla nevýznamná, inaktivace nemohla být spojována s denaturací proteinu. Enzymová aktivita nebyla ovlivněna kyselinou p-chlormerkuribenzoovou (p-CMB), 2-merkaptoethanolem a N-ethylmaleinimidem (NEM) při pH 7.0, což ukazuje, že cysteinové zbytky nebyly nezbytné ani pro katalytickou aktivaci ani pro strukturální vlastnosti lipasy. Inaktivace působením K3Fe(CN)6 ukázala, že jiný oxidovatelný zbytek aminokyseliny by mohl být důležitý. Inaktivace N-ethylmaleinimidem při pH 9.0 prokázala spoluúčast histidinu v katalýze. Fenylmethylsulfonylchlorid (PMSF) silně inhiboval enzym, což by vysvětlovalo esenciální úlohu serinového zbytku
    Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0010049

     
     

Počet záznamů: 1  

  Tyto stránky využívají soubory cookies, které usnadňují jejich prohlížení. Další informace o tom jak používáme cookies.