0025248 - ÚMG 2006 RIV NL eng J - Článek v odborném periodiku
Šanderová, Hana - Jonák, Jiří
Opposite roles of domains 2+3 of Escherichia coli EF-Tu nd Bacillus stearothermophilus EF-Tu in the regulation of EF-Tu GTPase activity.
[Opačný vliv domén 2+3 z EF-Tu z Escherichia coli a Bacillus stearothermophilus na regulaci GTPázové aktivity EF-Tu.]
Biochimica Et Biophysica Acta-Proteins and Proteomics. Roč. 1752, č. 1 (2005), s. 11-17. ISSN 1570-9639. E-ISSN 1878-1454
Grant CEP: GA ČR(CZ) GA303/02/0689
Výzkumný záměr: CEZ:AV0Z50520514
Klíčová slova: elongation factor Tu * GTPase regulation * G-domain
Kód oboru RIV: EB - Genetika a molekulární biologie
Impakt faktor: 2.980, rok: 2005

The effect of noncatalytic domains 2+3 on the intrinsic activity and thermostability of the EF-Tu GTPase center was evaluated in experiments with isolated domains 1 and six chimeric variants of mesophilic Escherichia coli (Ec) and thermophilic Bacillus stearothermophilus (Bst) EF-Tus. The isolated catalytic domains 1 of both EF-Tus displayed similar GTPase activities at their optimal temperatures. However, noncatalytic domains 2+3 of the EF-Tus influenced the GTPase activity of domains 1 differently, depending on the domain origin. Ecdomains 2+3 suppressed the GTPase activity of the Ecdomain 1, whereas those of BstEF-Tu stimulated the Bstdomain 1 GTPase. Domain 1 and domains 2+3 of both EF-Tus positively cooperated to heat-stabilize their GTPase centers to attain optimal activity at a temperature close to the optimal growth temperature of either organism. This can be explained by a stabilization effect of domains 2+3 on a-helical regions of the G-domain as revealed by CD spectroscopy.

Cílem práce byla charakterizace účinku nekatalytických domén 2+3 na vnitřní GTPázovou aktivitu a termostabilitu GTPázového centra EF-Tu. Porovnány byly aktivity izolované domény 1 a šesti chimerních variant EF-Tu složených z domén mezofilního (Escherichia coli) a termofilního (Bacillus stearothermophilus) proteinu. Izolované katalytické domény 1 z obou EF-Tu měly ve svých teplotních optimech podobnou GTPázovou aktivitu. Nekatalytické domény 2+3 různě ovlivnily GTPázovou aktivitu domén 1. Domény 2+3 z E. coli snižovaly GTPázovou aktivitu domény 1 z E. coli, zatímco domény 2+3 z B. stearothemophilus stimulovaly GTPázu domény 1 z B. stearothermophilus. Dále, doména 1 a domény 2+3 pozitivně kooperovaly při tepelné stabilizaci jejich GTPázových center na úroveň optimální růstové teploty obou organismů. Měření CD spektroskopie v 220 nm ukázalo, že domény 2+3 stabilizují a-helikální oblasti G-domén.
Trvalý link: http://hdl.handle.net/11104/0115657